[發明專利]一種利用氣升式發酵罐分批補料發酵云芝的方法

有效

• 申請號: 202011372830.9
• 申請日: 2020-11-30
• 公開（公告）號: CN112625915B
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發明（設計）人: 徐慶陽;王英燕;紀樂軍;范祎立;曹寶臣
• 申請（專利權）人: 江蘇神華藥業有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/38;C12R1/645
• 代理公司: 北京思創大成知識產權代理有限公司 11614
• 代理人: 高爽

本發明提供了一種利用氣升式發酵罐分批補料發酵云芝的方法，包括云芝菌的種子液培養，其特征在于，種子液接種到氣升式發酵罐中分批補料發酵培養云芝菌后重復分批發酵云芝菌；補料指的補加葡萄糖、低聚肽和氫氣。本發明方法能夠提高生產效率，提升產品的品質，降低生產成本。

技術領域

本發明涉及真菌培養技術領域，尤其是一種利用氣升式發酵罐分批補料發酵云芝的方法。

背景技術

云芝，又叫做灰芝、瓦菌、彩云革蓋菌，為多孔菌科植物云芝的子實體或菌絲體，是最具藥用價值的真菌之一，有清熱、抗腫瘤的功效。云芝是最具藥用價值的真菌之一，具有清熱、解毒、消炎、抗癌、保肝等功效。云芝中主要活性成分為云芝多糖，云芝多糖具有免疫調節功能，是良好的免疫增強劑，具有增強免疫細胞功能和識別能力，提高IgM的量等作用；云芝多糖同時具有保肝護肝作用，可顯著降低血清轉氨酶，對肝組織病變和肝壞死有明顯的修復作用。云芝性寒，味微甘，有清熱、消炎功效。現代醫藥學研究表明，從云芝子實體、菌絲體、發酵液中提取的多糖，均具有強烈的抑癌活性，并在日本成為一種抗惡性腫瘤的藥物。

云芝的液態發酵培養是指將菌絲體接種于液體培養基中，強制通入無菌空氣進行培養的方式，菌絲體通過培養基獲得生長繁殖或合成代謝產物所必需的營養物質。云芝液態發酵培養過程中，除了菌絲體的大量增殖外，還會在發酵液中產生多糖、三萜酸、多肽、生物堿、維生素等活性物質。

但是，目前生產液體發酵培養云芝主要通過機械攪拌通風發酵罐分批發酵培養。存在以下幾種問題。1.發酵罐的機械攪拌會使云芝菌的菌絲體斷裂，影響菌絲體生長和胞內營養物質的合成。2.分批發酵方式生產效率低、生產強度低，設備利用率低。這些原因會使云芝菌產品質量下降、生產成本高昂，影響行業健康發展。

現代醫學研究發現，氫和低聚肽(小分子活性肽)有抗凋亡、抗氧化和抗炎癥等生理保健功能。在清除自由基、美容養顏、改善記憶力、治療高血壓、心臟病等功能。特別是低聚肽在發酵領域的應用已經嶄露頭角。

發明內容

為解決現有云芝菌液體培養的技術問題，本發明提供一種采用氣升式發酵罐分批補料發酵培養云芝菌的方法。

為實現上述目的采用的具體方案如下：

一種利用氣升式發酵罐重復分批發酵云芝的方法，包括云芝菌的種子液培養，種子液接種到氣升式發酵罐中分批補料發酵培養云芝菌后重復分批發酵云芝菌；補料指的補加葡萄糖、低聚肽和氫氣；其中，發酵培養條件為通風比1：0.5-1.5vvm，罐壓0.02～0.05Mpa，在25～30℃下發酵培養。

優選的，所述的重復分批發酵云芝菌指的是在氣升式發酵罐中培養云芝到中后期(得率1％左右)，放出85-95％的發酵液，向發酵罐中補充相同體積的新鮮培養基，進行下一批發酵，放出的培養基進行下一步提取。

優選發酵培養條件為通風比為1：0.5-1.5vvm，罐壓0.02～0.05Mpa，在28℃下發酵培養。

優選發酵培養采用的培養基為葡萄糖4％，玉米粉2％，胰蛋白胨0.6％，麩皮1％，磷酸氫二鉀0.1％，硫酸鎂0.1％，葵花籽油0.1％，pH為5。

優選所述的葡萄糖補料方法如下：當發酵罐中的發酵液葡萄糖濃度在0.5-1％時，流加1％的葡萄糖；當葡萄糖濃度在低于0.5％時，流加1.5％的葡萄糖；發酵液葡萄糖達到2％時，停止補糖。

優選所述的低聚肽補料方法為在發酵第36h和第48h后向發酵液中加入1％的低聚肽。所述的低聚肽為小麥低聚肽、玉米低聚肽、花生低聚肽、紅球藻低聚肽中的一種或幾種混合,這些肽的分子量均低于3000Da。

優選氫氣補料方法如下：從發酵第36-60h向發酵罐中通入氫氣，使氫氣在發酵液中的溶解度達到0.8ppm。

與現有技術比較本發明的有益效果：