[發明專利]一種中華鱉的選育方法

有效

• 申請號: 202011365327.0
• 申請日: 2020-11-28
• 公開（公告）號: CN112493204B
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發明（設計）人: 梁正方
• 申請（專利權）人: 溫嶺市萬融特種生態養殖有限公司
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;C02F3/34;C02F103/20
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種中華鱉的選育方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)利用SNP單核苷酸多態性分析影響中華鱉性狀的多個基因片段，篩選出具有抗逆性、健康評級優勢的中華鱉苗種；

(2)對步驟(1)中得到的中華鱉苗種進行無特定病毒性病原檢測，篩選出不帶有特定病毒的中華鱉苗種；

(3)對養殖池塘進行消毒處理，使其符合養殖要求；

(4)制備多細菌敏感型噬菌體微生態制劑；

(5)將步驟(2)獲得的中華鱉置于步驟(3)消毒處理后的池塘中，并在養殖過程中定期撒入步驟(4)制備得到的多細菌敏感型噬菌體微生態制劑；

(6)定期對養殖水水質進行檢測，確定水質情況，根據需要調整多細菌敏感型噬菌體微生態制劑撒入頻率；

所述步驟(1)的步驟如下：

(1.1)篩選出中華鱉苗種中個大、體壯、大小相差不多的足夠數量苗種，將苗種表面進行消毒處理，置于養殖池塘養殖至一定時間后捕捉，并對每只中華鱉進行編號處理；

(1.2)每只苗種的裙邊取少許組織提取DNA，選取LDH基因作為SNP位點篩選對象；根據基因序列設計引物，然后利用PCR擴增出每只苗種的LDH基因片段保存待用；

(1.3)對每只中華鱉健康狀況及體重進行評級，所述健康評級的標準D為：評估中華鱉表面有害菌指標A及外傷B，對每只中華鱉進行稱重C，按照公式D＝-2A-0.5B+3C進行計算，按照健康評級的標準D從大到小排列；

(1.4)通過核查抗逆性狀好的中華鱉SNP多態位點確定突變點的位置，篩選出較優苗種；所述抗逆性狀包括抗病性、抗寒性、抗低氧性，選擇具有抗逆性、健康評級的標準D在前50％的中華鱉苗種；

所述步驟(1.1)中篩選出的中華鱉苗種體重為50-150g大小，其表面采用5％的食鹽水進行消毒處理；

所述步驟(1.2)中采用的擴增引物SEQ ID NO.1序列核苷酸序列5'-3'為ATATGCCTCGAGCGTCATGGTGATAT，和SEQ ID NO.2序列核苷酸序列5'-3'為TGAAACTCCAGTTAAGGTCTTATAGAACT；

所述步驟(2)的篩選病原檢測對象為WSSV、CMNV、TSV；所述噬菌體微生態制劑為三種噬菌體混合物，包括的噬菌體選自副溶血性弧菌噬菌體、葡萄球菌噬菌體、沙門氏菌噬菌體、溶藻弧菌噬菌體、大腸桿菌噬菌體、茄科雷爾氏菌噬菌體中的三種；所述三種噬菌體混合物選擇為副溶血性弧菌噬菌體、葡萄球菌噬菌體、沙門氏菌噬菌體時，三者比例為5-10:20-25:2-3；所述三種噬菌體混合物選擇為溶藻弧菌噬菌體、大腸桿菌噬菌體、茄科雷爾氏菌噬菌體時，三者比例為2-4:20-30:1-2。

2.如權利要求1所述的一種中華鱉的選育方法，其特征在于，對所述池塘的消毒處理方式為：(3.1)采用石灰乳對池塘進行潑灑處理，每畝用量為50-60kg，所述石灰乳的濃度為25％-27％；(3.2)石灰乳消毒后，采用漂白粉進行處理，每畝池塘使用1.7kg；(3.3)測量水體pH值，待pH值在中性后加水至適當水位。

3.如權利要求1所述的一種中華鱉的選育方法，其特征在于，所述噬菌體微生態制劑的撒入頻率為每月至少3次。

4.如權利要求1所述的一種中華鱉的選育方法，其特征在于，所述步驟(2)中無特定病毒性病原檢測的方法為基于病毒mRNA的qRT-PCR監測的病毒滅活快速檢測方法，在噬菌體微生態制劑撒入間隙還進行益生菌菌劑的撒入，所述益生菌菌劑選自芽孢桿菌、乳桿菌屬、乳球菌、腸球菌、片球菌、明珠菌、梭菌屬、酵母菌，配比為2-3:10-18:20-25:4-8:4-7:40-45:20-25:3-6。