[發明專利]一種穩定檢測抗CD22單抗生物學活性的方法在審
| 申請號： | 202011365050.1 | 申請日： | 2020-11-27 |
| 公開（公告）號： | CN112626162A | 公開（公告）日： | 2021-04-09 |
| 發明（設計）人： | 王蘭;郭莎;于傳飛;張峰;王文波;段茂芹;郭瀟;劉春雨 | 申請（專利權）人： | 中國食品藥品檢定研究院 |
| 主分類號： | C12Q1/02 | 分類號： | C12Q1/02;G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京預立生科知識產權代理有限公司 11736 | 代理人： | 孟祥斌;李紅偉 |
| 地址： | 100050*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 穩定 檢測 cd22 抗生 活性 方法 | ||
1.一種穩定、高效地檢測抗CD22單抗生物學活性的方法，所述方法包括：
(1)將proteinA加入到96孔微孔板，靜置包被；
(2)將抗CD22抗體梯度稀釋后加入到(1)中的96孔微孔板，靜置包被；
(3)向B細胞懸液中加入抗IgM抗體，然后加入到(2)中的96孔微孔板進行孵育；
(4)向(3)中96孔微孔板內加入檢測試劑，用酶標儀檢測活細胞水平。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，proteinA的預包被濃度為0.1-10μg/ml，優選的，濃度為1μg/ml，優選的，(1)中靜置方式為室溫靜置或2～8℃靜置，優選的，靜置方式為室溫靜置，更優選的，室溫靜置時間為1h。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，抗CD22抗體的稀釋比例為1:1.5-1:4，優選的，稀釋比例為1:2。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，抗CD22抗體包被時間為30-60min，優選的，包被時間為30min。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述B細胞包括：Ramos、GA-10細胞、Raji細胞、Daudi細胞、BJAB細胞。
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，(3)中加入到96孔微孔板的B細胞的密度為4×103/孔-1×105/孔，優選的，細胞的密度為4×104/孔。
7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，加入抗IgM抗體終濃度為0.4～10μg/ml，優選的，終濃度為1μg/ml。
8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，(3)中細胞孵育的時間為16-96h，優選的，孵育時間為48h。
9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，(4)中的檢測試劑為CellTiterblue、MTS或CellTiter Glo，優選的，檢測試劑為CellTiter Glo。
10.權利要求1-9所述的方法在抗CD22抗體藥物的質量控制中的應用。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于中國食品藥品檢定研究院，未經中國食品藥品檢定研究院許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202011365050.1/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
