[發明專利]一種養心安眠膠囊HPLC特征圖譜構建方法

有效

• 申請號: 202011360100.7
• 申請日: 2020-11-27
• 公開（公告）號: CN112946094B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發明（設計）人: 徐云;徐建;展月;李朋蓮;張新君;鄭廣晶;崔憲利;王卉玲;王昭兵
• 申請（專利權）人: 吉林修正藥業新藥開發有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/36;G01N30/74;G01N30/86
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 王洋

1.一種養心安眠膠囊HPLC特征圖譜構建方法，包括：

A )取養心安眠膠囊內容物，溶劑溶解，得到待測液；所述溶劑為甲醇或50~70%乙醇；

B）將待測液采用高效液相色譜法測定，得到養心安眠膠囊HPLC特征圖譜；還包括制備參照物溶液：分別取芒果苷、五味子醇甲、甘草酸銨、五味子甲素和五味子乙素，采用甲醇溶解，得到參照物溶液；

將所述參照物溶液采用高效液相色譜法測定，得到參照物的色譜圖；并根據參照物的色譜圖對養心安眠膠囊HPLC特征圖譜的成分進行定性；

所述高效液相色譜法色譜條件為：色譜柱為C18柱；檢測波長為230nm，流動相A為乙腈，流動相B為0.05%磷酸溶液，梯度洗脫；所述梯度洗脫具體為：

0～20min，A相：5～35%、B相：95～65%；

20～21min，A相：35～50%、B相：65～50%；

21～50min，A相：50～100%、B相：50～0%。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述參照物溶液的濃度具體為：芒果苷25~75μg/mL、五味子醇甲25~100μg/mL、甘草酸銨25~75μg/mL、五味子甲素25~75μg/mL和五味子乙素25~75μg/mL。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述色譜柱為Agilent ZORBAX SB-C18柱，規格為5μm，4.6×250mm；

流動相流速為0.8～1.2mL/min；柱溫30℃～40℃，進樣量為5~15μL。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述流動相流速為1mL/min；柱溫30℃，進樣量為5~10μL。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統對養心安眠膠囊HPLC特征圖譜的相似度進行評價，得到由10個特征峰構成的養心安眠膠囊HPLC標準特征圖譜，其中峰2為芒果苷，峰3為甘草酸銨峰，峰4（S）為五味子醇甲峰，峰8為五味子甲素峰，峰10為五味子乙素峰。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，在所述標準特征圖譜中，以五味子醇甲峰為參照峰S峰，計算各特征峰與S峰的相對保留時間，所述相對保留時間在規定值的±2％之內，所述規定值分別為：0.24-峰1、0.41-峰2、0.60-峰3、1.00-峰4、1.05-峰5、1.12-峰S、1.22-峰7、1.39-峰8、1.44-峰9、1.45-峰10。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟A）所述溶劑溶解后為超聲處理，所述超聲處理的時間為20~40min。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟A）所述養心安眠膠囊的質量g和溶劑的體積mL的比為（0.5~2）：（20~50）。