[發明專利]一種急性分離哺乳動物海馬細胞的方法有效
| 申請號： | 202011353280.6 | 申請日： | 2020-11-26 |
| 公開（公告）號： | CN112410299B | 公開（公告）日： | 2022-08-19 |
| 發明（設計）人： | 楊陽 | 申請（專利權）人： | 四川大學華西醫院 |
| 主分類號： | C12N5/079 | 分類號： | C12N5/079 |
| 代理公司： | 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峽;張娟 |
| 地址： | 610000 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 急性 分離 哺乳動物 海馬 細胞 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種急性分離哺乳動物海馬細胞的方法，其特征在于，包括如下步驟：
1)取海馬組織，在0～4℃下將海馬組織剪碎；
2)用1～3mg/ml木瓜酶消化15～25min，吸出木瓜酶，用1～3mg/ml膠原酶消化15～25min，消化過程持續通入95％O2和5％CO2混合氣體；
3)終止消化，用DMEM洗去酶溶液，移入神經基礎培養基混合液；
4)玻璃管輕柔吹打，靜置，吸取上層混懸液加入培養皿；
5)室溫下貼壁30～45min。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟1)的剪碎過程中，海馬位于HBSS或DMEM培養基中。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟1)中剪碎至1mm2的碎塊。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟2)中木瓜酶濃度為2mg/ml，消化時間20min；
和/或，膠原酶濃度為2mg/ml，消化時間20min。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述動物為小鼠。
6.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法還包括：
6)在室溫下培養保存。
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