[發(fā)明專利]一種用于鑒定奶牛基因型的引物及其應用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202011343894.6
• 申請日: 2020-11-26
• 公開（公告）號: CN114540505A
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發(fā)明（設計）人: 張傳強;于懷林;馮欣;國鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 內(nèi)蒙古伊利實業(yè)集團股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京三友知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11127
• 代理人: 韓蕾;李輝

1.一種用于鑒定奶牛基因型的引物，其包括第一引物與第二引物，其中，第一引物為20～70bp且包括如SEQ ID No.1所示序列中的連續(xù)的至少20bp的片段；第二引物為20～70bp且包括如SEQ ID No.2所示序列中的連續(xù)的至少20bp的片段。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物，其中：

第一引物為50～70bp且包括如SEQ ID No.1所示序列中的連續(xù)的至少40bp的片段；第二引物為50～70bp且包括如SEQ ID No.2所示序列中的連續(xù)的至少40bp的片段。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物，其中：

第一引物具有如SEQ ID No.1所示序列，或者為在SEQ ID No.1所示序列中經(jīng)過取代、缺失或添加一個或多個核苷酸且與SEQ ID No.1具有相同功能的由SEQ ID No.1衍生的核苷酸序列；

第二引物具有如SEQ ID No.2所示序列，或者為在SEQ ID No.2所示序列中經(jīng)過取代、缺失或添加一個或多個核苷酸且與SEQ ID No.2具有相同功能的由SEQ ID No.2衍生的核苷酸序列。

4.權(quán)利要求1-3任一項所述的引物在鑒定奶牛β-酪蛋白基因型中的應用。

5.權(quán)利要求1-3任一項所述的引物在制備用于鑒定奶牛β-酪蛋白基因型的DNA條形碼或檢測試劑盒中的應用。

6.一種用于鑒定奶牛基因型的試劑盒，其包括：

權(quán)利要求1-3任一項所述的引物；和/或

DNA片段和/或其條形碼，其中所述DNA片段是利用權(quán)利要求1-3任一項所述的引物、分別以不同β-酪蛋白基因型奶牛的DNA為模板擴增得到的。

7.一種鑒定奶牛基因型的方法，該方法包括：

從待測樣品中提取總DNA；

以所提取的總DNA為模板，利用權(quán)利要求1-3任一項所述的引物進行PCR擴增；

對上述擴增結(jié)果進行分析判斷。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中，所述待測樣品來自需要鑒定β-酪蛋白基因型的奶牛的血液或組織材料。

9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的方法，其中，所述PCR擴增的條件為：

94℃預變性3min；94℃變性10-60sec，50-65℃退火10-60sec，72℃延伸1-10min，此步驟20-40個循環(huán)；72℃保持1-10min。

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中，對擴增結(jié)果進行分析判斷的過程包括：

對擴增產(chǎn)物進行測序；和/或

將擴增產(chǎn)物的序列與權(quán)利要求6中所述的DNA片段的序列、測序圖譜和/或條形碼進行比較。