[發(fā)明專利]用于HER2基因突變檢測的核酸試劑、試劑盒及檢測系統(tǒng)

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011340352.3
• 申請日: 2020-11-25
• 公開（公告）號: CN112458169A
• 公開（公告）日: 2021-03-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 曹云娣;李程;肖金平;孫志堅;康平
• 申請（專利權(quán)）人: 北京科途醫(yī)學(xué)科技有限公司;浙江科途醫(yī)學(xué)科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京英創(chuàng)嘉友知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11447
• 代理人: 耿超

本公開涉及一種用于HER2基因A775_G776insYVMA突變檢測的核酸試劑，所述核酸試劑包括SEQ ID NO.1～2所示的引物。利用本公開提供的核酸試劑，能夠快速實現(xiàn)對HER2基因A775_G776insYVMA突變的低成本檢測，且檢測的準(zhǔn)確度高、特異性好、靈敏度高。

技術(shù)領(lǐng)域

本公開涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及一種用于HER2基因A775_G776insYVMA突變檢測的核酸試劑、試劑盒及系統(tǒng)。

背景技術(shù)

HER2基因位于17號染色體q21上，其能夠編碼具有酪氨酸激酶活性的高同源蛋白質(zhì)表皮生長因子受體-2(HER2)。HER2蛋白與配體結(jié)合后，能夠磷酸化形成具有活性的同源二聚體或異源二聚體，并產(chǎn)生酪氨酸激酶活性，從而激活下游信號通路，影響細(xì)胞的增殖、分化和轉(zhuǎn)移。

HER2基因突變在非小細(xì)胞型肺癌(NSCLC)患者中的發(fā)生率約為1％～2％。在NSCLC患者中，HER2基因的突變形式主要是在20號外顯子插入一個G776(YVMA)，形成A775_G776insYVMA突變，該種形式突變的發(fā)生率約為70％。目前，針對HER2基因突變的治療方式主要是靶向治療，治療過程中需要利用特定的靶向藥物，因此，準(zhǔn)確檢測HER2基因突變，對于其治療具有重要意義。

目前，HER2基因突變的檢測方法主要有熒光原位雜交法(FISH)、免疫組化法(IHC)和Sanger測序法。然而，F(xiàn)ISH檢測費用高，需要專業(yè)的人員技術(shù)，且檢測結(jié)果主觀性強(qiáng)，檢測時間長；IHC適用于大量樣本篩選，且結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)不夠統(tǒng)一，檢測準(zhǔn)確性不高；Sanger測序雖然是基因檢測的金標(biāo)準(zhǔn)，但是靈敏度低，需要發(fā)生突變的等位基因占比超過20％才能檢出，且檢測時的單次上樣量需取20ng以上，對于樣本中腫瘤細(xì)胞的含量要求高。

因此，亟需一種成本低廉、靈敏、高效的HER2基因突變的檢測方法。

發(fā)明內(nèi)容

本公開提供一種用于HER2基因A775_G776insYVMA突變檢測的核酸試劑、試劑盒及系統(tǒng)。

為了實現(xiàn)上述目的，第一方面，本公開提供用于HER2基因A775_G776insYVMA突變檢測的核酸試劑，所述核酸試劑包括SEQ ID NO.1～2所示的引物。

可選地，相對于1μmol的SEQ ID NO.1所示的引物，由SEQ ID NO.2所示的引物的含量為0.2～1μmol。

第二方面，本公開提供一種用于HER2基因A775_G776insYVMA突變檢測的試劑盒，該試劑盒含有第一方面中任意一項所述的核酸試劑。

可選地，所述試劑盒中還含有PCR反應(yīng)體系緩沖液、dNTP、AceTaq DNAPolymerase、空白對照品、陰性對照品、陽性對照品和ddH₂O。

第三方面，本公開提供第一方面中任意一項所述的核酸試劑在制備用于HER2基因A775_G776insYVMA突變檢測的試劑盒中的用途。

第四方面，本公開提供一種用于HER2基因A775_G776insYVMA突變檢測的系統(tǒng)，該系統(tǒng)包括待測樣本處理裝置、擴(kuò)增裝置、檢測裝置和計算裝置；其中，

所述待測樣本處理裝置，用于對所述待測樣本進(jìn)行DNA提取處理，得到所述待測樣本的總DNA；

所述擴(kuò)增裝置具有反應(yīng)管，所述反應(yīng)管為裝載有PCR試劑的試劑儲藏容器，所述擴(kuò)增裝置能夠利用所述PCR試劑對所述待測樣本的總DNA進(jìn)行qPCR擴(kuò)增，得到擴(kuò)增產(chǎn)物，其中，所述PCR試劑包括第一方面所述的核酸試劑；

所述檢測裝置用于對所述擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行核酸電泳檢測，得到核酸電泳檢測結(jié)果；

所述計算裝置包括存儲器和處理器，所述存儲器中存儲有計算機(jī)程序，所述處理器被配置為執(zhí)行所述存儲器中存儲的計算機(jī)程序，以實現(xiàn)如下判別：