[發明專利]拆分2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯的方法

在審

• 申請號: 202011340227.2
• 申請日: 2020-11-25
• 公開（公告）號: CN114540456A
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 王舒;田振華;徐文選;徐爭;王夏昆;程占冰;包文艷;孫傳民
• 申請（專利權）人: 弈柯萊生物科技（上海）股份有限公司
• 主分類號: C12P41/00
• 分類號: C12P41/00;C12P17/02;C12P13/04
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 王衛彬;呂學辰

本發明公開了一種將(R)?2?(芐氧基羰基氨基)?2?(氧雜環丁烷?3?基)乙酸甲酯轉換為(R)?2?(芐氧基羰基氨基)?2?(氧雜環丁烷?3?基)乙酸的酶催化方法以及拆分2?(芐氧基羰基氨基)?2?(氧雜環丁烷?3?基)乙酸甲酯的方法。所述酶催化方法中的所述酶包括氨基酸序列如SEQ ID NO:6、7、9和10所示的酶中的一種或多種。發明采用酶催化的拆分方法制得(S)?2?(芐氧基羰基氨基)?2?(氧雜環丁烷?3?基)乙酸甲酯的收率可達30％，且產品ee值高，可達93％以上，經純化后ee值高達99.5％以上，適合工業化生產。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種非天然氨基酸衍生物的制備方法，特別是一種拆分2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯的方法。

背景技術

甘氨酸類衍生物手性2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯是一種非天然氨基酸，是重要的醫藥中間體。如WO2014152127A1報道了(S)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯可以用作二肽或三肽環氧酮蛋白酶抑制劑的中間體；European Journal of Medicinal Chemistry 45,2010,160-170報道了(R)或(S)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯可以用作HIV-1蛋白酶抑制劑的中間體。

但是目前的制備方法都是得到消旋體2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯，再經拆分制得手性2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯。目前的拆分方法有HPLC分離法，但是拆分效率低下，不適合工業化生產。

如WO2014152127A1上公開的方法為將2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯進行催化加氫可以制得消旋體2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯，后經多步反應制得所需化合物后采用手性HPLC拆分得到所需手性化合物。

如European Journal of Medicinal Chemistry 45,2010,160-170公開的方法為3-氧雜環丁酮和Z-α-膦酰基甘氨酸-三甲酯(Z-α-phosphonoglycine-trimethyl ester)進行Witting-Horner反應得到二脫氫-α-氨基酸甲酯，再經催化加氫，以及Cbz保護可得消旋體2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯，后經HPLC分離得到所需的手性化合物。

另外還有采用手性試劑進行化學拆分的方法，如II Farmaco,2001,56,609–613中公開了可以通過L-(+)-酒石酸或者D-(-)-酒石酸進行消旋體2-氨基-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯拆分的方法，但是拆分產率小于20％。

因此目前需要開發一種高效拆分制得(S)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯的方法。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是為克服現有技術中拆分消旋體2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯的方法中拆分效率低下、不適合工業化生產的缺陷，提供一種非天然氨基酸衍生物的制備方法。本發明采用酶催化的拆分方法制得(S)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯的收率可達30％，且產品ee值高，可達93％以上，經純化后ee值高達99.5％以上，適合工業化生產。

底物：化合物I，消旋體2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯，CAS號：1255717-04-4，化合物I結構式如下：

產物1：化合物II(S)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯，CAS號：1213783-62-0，化合物II結構式如下：