[發明專利]拆分2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯的方法

在審

• 申請號: 202011340227.2
• 申請日: 2020-11-25
• 公開（公告）號: CN114540456A
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 王舒;田振華;徐文選;徐爭;王夏昆;程占冰;包文艷;孫傳民
• 申請（專利權）人: 弈柯萊生物科技（上海）股份有限公司
• 主分類號: C12P41/00
• 分類號: C12P41/00;C12P17/02;C12P13/04
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 王衛彬;呂學辰

1.一種將(R)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯轉換為(R)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸的酶催化方法，其特征在于，使用包括氨基酸序列如SEQ ID NO:6、7、9和10所示的酶中的一種或多種作為催化酶。

2.一種拆分2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯的方法，其包括如權利要求1所述的酶催化方法；其中：

所述2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯為消旋體，或者為R或S富集的2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，其包括將2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯以及所述催化酶混合、在溶劑中進行反應。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯與所述催化酶的用量比為1g:1500U～1g:25000U；例如，1g:4680U、1g:5276U、1g:6645U、1g:8920U；

較佳地，所述2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯在反應體系中的濃度為15～50g/L；優選20g/L或者40g/L。

5.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述反應的pH為6～8，優選6.5～7.5。

6.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述溶劑為水或者有機溶劑；所述有機溶劑優選DMSO。

7.如權利要求3所述的方法，其特征在于，反應體系中還包含底物分散劑；所述底物分散劑與所述2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯的質量比為0.95:1～1.05:1，優選1:1；

所述底物分散劑優選硅藻土和/或活性炭。

8.如權利要求3～7任一項所述的方法，其特征在于，所述反應在20～35℃下進行。

9.氨基酸序列如SEQ ID NO:6、7、9或10所示的酶在催化(R)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯轉換為(R)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸中的應用。

10.氨基酸序列如SEQ ID NO:6、7、9或10所示的酶在拆分2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯中的應用；較佳地，所述拆分用于制備(S)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯。