[發明專利]拆分2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯的方法在審
【權利要求書】:
1.一種將(R)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯轉換為(R)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸的酶催化方法,其特征在于,使用包括氨基酸序列如SEQ ID NO:6、7、9和10所示的酶中的一種或多種作為催化酶。
2.一種拆分2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯的方法,其包括如權利要求1所述的酶催化方法;其中:
所述2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯為消旋體,或者為R或S富集的2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯。
3.如權利要求2所述的方法,其特征在于,其包括將2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯以及所述催化酶混合、在溶劑中進行反應。
4.如權利要求3所述的方法,其特征在于,所述2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯與所述催化酶的用量比為1g:1500U~1g:25000U;例如,1g:4680U、1g:5276U、1g:6645U、1g:8920U;
較佳地,所述2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯在反應體系中的濃度為15~50g/L;優選20g/L或者40g/L。
5.如權利要求3所述的方法,其特征在于,所述反應的pH為6~8,優選6.5~7.5。
6.如權利要求3所述的方法,其特征在于,所述溶劑為水或者有機溶劑;所述有機溶劑優選DMSO。
7.如權利要求3所述的方法,其特征在于,反應體系中還包含底物分散劑;所述底物分散劑與所述2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯的質量比為0.95:1~1.05:1,優選1:1;
所述底物分散劑優選硅藻土和/或活性炭。
8.如權利要求3~7任一項所述的方法,其特征在于,所述反應在20~35℃下進行。
9.氨基酸序列如SEQ ID NO:6、7、9或10所示的酶在催化(R)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯轉換為(R)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸中的應用。
10.氨基酸序列如SEQ ID NO:6、7、9或10所示的酶在拆分2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯中的應用;較佳地,所述拆分用于制備(S)-2-(芐氧基羰基氨基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯。
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