[發(fā)明專利]甲鈷胺的合成和精制純化方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011339974.4
• 申請(qǐng)日: 2020-11-25
• 公開（公告）號(hào): CN114539331A
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉新宇;楊昆;申明亮;秦研;畢榮生;王立家;侯伯男
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 哈爾濱三聯(lián)藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號(hào): C07H1/00
• 分類號(hào): C07H1/00;C07H1/06;C07H23/00
• 代理公司: 北京思元知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11598
• 代理人: 余光軍;霍雪梅

本發(fā)明公開了一種甲鈷胺的合成和精制純化方法，包括：(1)以維生素B12為原料，六水合硫酸亞鐵(Ⅱ)銨?水為反應(yīng)液，加入硼氫化鈉進(jìn)行還原反應(yīng)；(2)以甲基磷酸酯作為甲基化試劑，在堿性條件下用鹵代亞銅鹽作為催化劑進(jìn)行甲基化反應(yīng)；(3)反應(yīng)產(chǎn)物初步分離處理得到甲鈷胺粗品；(4)將粗品精制純化得到純品。本發(fā)明使用成本低廉、反應(yīng)條件溫和、活性高且毒性小的甲基磷酸酯作為甲基化試劑，采用磷酸酯?亞銅離子為催化體系，實(shí)現(xiàn)溫和、低毒、安全、徹底的甲基化反應(yīng)，極大改善了甲鈷胺粗品品質(zhì)。本發(fā)明精制純化工藝有效去除生產(chǎn)工藝過程中引入的雜質(zhì)，有關(guān)物質(zhì)最大單總雜小于0.1％，總雜小于0.2％，保證了產(chǎn)品質(zhì)量的可控性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及甲鈷胺的制備方法，尤其涉及甲鈷胺的合成以及精制純化方法，屬于甲鈷胺的合成和純化領(lǐng)域。

背景技術(shù)

甲鈷胺用于治療缺乏維生素B12引起的巨幼細(xì)胞性貧血，也用于周圍神經(jīng)病。與其它維生素B12類藥物相比，甲鈷胺在神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)傳遞性好；可促進(jìn)核酸、蛋白及脂肪的代謝；藥理上通過促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)核酸和蛋白質(zhì)以及神經(jīng)骨鞘的合成從而修復(fù)受損傷的周圍神經(jīng)。臨床上對(duì)糖尿病神經(jīng)障礙、多發(fā)性神經(jīng)炎等周圍神經(jīng)疾病(尤其是對(duì)麻痛及麻痹)有明顯效果，是目前臨床上治療該疾病的有效藥物，并且副作用極小。此外，有研究表明，甲鈷胺是有效治療帕金森癥、阿爾茲海默綜合癥、肌肉萎縮和神經(jīng)衰弱的潛在藥物。

現(xiàn)有的甲鈷胺的制備方法均為采用還原和甲基化兩步的合成方法及相對(duì)應(yīng)的純化工藝，以得到甲鈷胺成品，其主要的具體制備方法包括如下幾種：

(1)用維生素B12為原料，以水為溶媒，通過硼氫化鈉還原，并加入硝酸鈷作為催化劑，避光，并通氬氣除氧，以碘甲烷為甲基化試劑，即制備得甲鈷胺；反應(yīng)液經(jīng)苯酚-二氯甲烷萃取除去水溶性鹽，再用蒸餾水自有機(jī)層萃取甲鈷胺，50℃減壓濃縮，然后羧甲基纖維素柱層析，最后丙酮析晶，可得合格甲鈷胺。

(2)以維生素B12為原料，甲醇-水為反應(yīng)液，同時(shí)加入羥鈷胺為催化劑，通過硼氫化鈉還原，避光，碘甲烷為甲基化試劑，反應(yīng)完畢后反應(yīng)液經(jīng)葡聚糖凝膠過濾，然后經(jīng)SEAE-sephadexA25和CM-sephadexC25色譜柱分離，即得合格產(chǎn)品。

(3)以維生素B12為原料，水為溶劑，硼氫化鈉還原，以硫酸亞鐵氨及氯化亞鐵為催化劑，碘甲烷甲基化，反應(yīng)完畢后產(chǎn)物先后通過硅膠-40柱，硅膠柱，HP-20柱等分離即可得到合格產(chǎn)品。

(4)以維生素B12為原料，在高純氮?dú)獗３窒拢褂梅琴|(zhì)子性極性溶劑作為反應(yīng)液，在強(qiáng)堿的作用下加入甲基化反應(yīng)試劑以對(duì)維生素B12進(jìn)行甲基化反應(yīng)，反應(yīng)完畢后于低溫下加冰水有大量固體析出，析出產(chǎn)物經(jīng)層析柱進(jìn)行層板分離后得甲鈷胺。檢測(cè)甲鈷胺晶體有關(guān)物質(zhì)最佳結(jié)果是單雜為0.13％，總雜≤0.72％。

現(xiàn)有甲鈷胺的制備方法技術(shù)中，大多數(shù)都以維生素B12為原料，硼氫化鈉還原，不同的甲基化試劑甲基化，反應(yīng)完畢后，經(jīng)不同的純化工藝而得到甲鈷胺成品。現(xiàn)有技術(shù)中關(guān)于甲基化試劑的選擇多是碘甲烷、硫酸二甲酯、對(duì)甲基苯磺酸甲酯、碳酸二甲酯等甲基化試劑，而碘甲烷、硫酸二甲酯、對(duì)甲基苯磺酸甲酯雖然活性較高，但是都有一定的毒性，使用需要謹(jǐn)慎；碳酸二甲酯雖然毒性較低，但是活性遠(yuǎn)遠(yuǎn)不足，導(dǎo)致甲鈷胺的粗品純度降低太多，后處理精制提純壓力很大。此外，現(xiàn)有技術(shù)中的后處理一般的方法是萃取后溶劑析晶，采用凝膠過濾吸附、柱層析分離提純等方法，雖然通過工藝改進(jìn)能夠提高純化效果，但成品質(zhì)量中有關(guān)物質(zhì)高，產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定。

有鑒于此，有必要對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的甲鈷胺的制備與后處理精制純化工藝方法予以改進(jìn)，以提高產(chǎn)品質(zhì)量。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種簡(jiǎn)便有效、穩(wěn)定、高純度且適合工業(yè)化生產(chǎn)的甲鈷胺的制備與后處理精制純化方法。

本發(fā)明的上述目的是通過以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：

一種甲鈷胺的合成和精制純化方法，包括：