[發明專利]基因編輯提高脂肪干細胞分化效率的方法有效
| 申請號： | 202011335511.0 | 申請日： | 2020-11-25 |
| 公開（公告）號： | CN112126620B | 公開（公告）日： | 2021-04-09 |
| 發明（設計）人： | 張海濤;陳帥 | 申請（專利權）人： | 中賽干細胞基因工程有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/077 | 分類號： | C12N5/077;C07K16/18 |
| 代理公司： | 成都魚爪智云知識產權代理有限公司 51308 | 代理人： | 趙晨宇 |
| 地址： | 472000 河南省*** | 國省代碼： | 河南;41 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基因 編輯 提高 脂肪 干細胞 分化 效率 方法 | ||
1.一種誘導脂肪干細胞分化為軟骨細胞的方法，其特征在于所述方法包括將miR-221敲除的脂肪干細胞在軟骨誘導培養基中誘導分化10d，每2d換液一次，即得分化的軟骨細胞；其中培養基由高糖DMEM加1％胎牛血清，5μg/L單克隆抗體，5μg/L TGF-β1，5μg/L TGF-β3，10μg/L BMP-6，50nmol/L抗壞血酸，2mg／L胰島素，1％青鏈霉素原液制備而成；所述單克隆抗體為R4D5，其輕鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，其重鏈可變區序列如SEQID NO：3所示；所述miR-221敲除的脂肪干細胞為采用CRISPR技術編輯獲得的，其中gRNA序列如SEQ ID NO：1所示。
2.一種誘導脂肪干細胞分化為軟骨細胞的培養基，其特征在于培養基由高糖DMEM加1％胎牛血清，5μg/L單克隆抗體，5μg/L TGF-β1，5μg/L TGF-β3，10μg/L BMP-6，50nmol/L抗壞血酸，2mg／L胰島素，1％青鏈霉素原液制備而成，所述單克隆抗體為R4D5，其輕鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，其重鏈可變區序列如SEQ ID NO：3所示。
3.一種特異性靶向RUNX2的單克隆抗體R4D5，其特征在于所述抗體的輕鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，其重鏈可變區序列如SEQ ID NO：3所示。
4.權利要求2所述的培養基或者權利要求3所述的單克隆抗體在體外誘導脂肪干細胞分化為軟骨細胞中的用途。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于中賽干細胞基因工程有限公司，未經中賽干細胞基因工程有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202011335511.0/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
