[發明專利]氟環唑和多菌靈的超高效液相色譜串聯質譜檢測方法

在審

• 申請號: 202011335108.8
• 申請日: 2020-11-24
• 公開（公告）號: CN112557529A
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發明（設計）人: 周勇;劉佳;朱航;馬海昊;劉哲銘;滿益龍;張城嘉;霍曉宜;賈楠;周小毛
• 申請（專利權）人: 湖南省農業生物技術研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 佛山粵進知識產權代理事務所(普通合伙) 44463
• 代理人: 耿鵬

本發明公開了一種柑橘全果和果肉中氟環唑和/或多菌靈殘留量的超高效液相色譜串聯質譜檢測方法，該方法包括如下步驟：1)標準工作液及基質標準溶液的配制；2)樣品工作液的配制：3)超高效液相色譜串聯質譜法檢測分析；4)檢測條件形成。本發明將QuEChERS法與超高效液相色譜?串聯質譜聯用儀結合，能夠對柑橘全果和果肉中的氟環唑和多菌靈進行高效而準確的檢測，使得成分檢測分析更快速，節省時間，且檢測靈敏度高，檢測數據精確，節約成本，提高檢測效率。

技術領域

本發明涉及柑橘中的氟環唑和多菌靈的檢測，尤其是指用超高效液相色譜串接質譜聯用儀對柑橘中氟環唑和多菌靈進行檢測的方法，該方法具有簡便快捷、靈敏度高、重現性好等優點。

背景技術

氟環唑是巴斯夫公司研發的低毒、長效、內吸型三唑類殺菌劑，能被植物的莖、葉吸收，并向上、向外傳導，可有效抑制病菌麥角甾醇的合成，阻礙病菌細胞壁的形成；可快速被靶標植株吸收并傳導至相應的感病部位，使病害浸染立刻停止；可以防治多種作物真菌性病害，對一系列禾谷類作物病害如眼紋病、白粉病、立枯病等具有良好的預防和防治效果，廣泛應用于香蕉、水稻、柑橘等作物上。

多菌靈屬苯并咪唑類殺菌劑，高效低毒，具有治療和保護作用，對子囊菌綱的某些病原菌和半知菌類中的大多數病原真菌有效，其作用機理是干擾病原菌有絲分裂中紡錘體的形成，影響細胞分裂，起到殺菌作用。對柑橘樹炭疽病具有較好防效。

柑橘在生產、儲藏和運輸過程中容易發生炭疽病和酸腐病等病害，目前常用采摘前噴藥和采摘后浸藥兩種方式，但是用藥種類和方式沒有統一的標準，氟環唑和多菌靈作為低毒高效的殺菌劑，可有效治療柑橘的炭疽病等。目前關于柑橘中氟環唑和多菌靈的超高效液相色譜串聯質譜檢測方法未見相關報道。

發明內容

本發明的目的在于針對目前氟環唑和多菌靈在柑橘中廣泛使用但分析方法缺失的現狀，提供一種超高效液相色譜串聯質譜法檢測柑橘全果和果肉中氟環唑和多菌靈的方法，其具有靈敏度高、重現性好、有機溶劑用量少等特點，可滿足氟環唑和多菌靈殘留分析要求。

為了達到上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種檢測柑橘全果和果肉中氟環唑和多菌靈殘留量的超高效液相色譜串聯質譜法，包括如下步驟：

(1)配制氟環唑和多菌靈的柑橘全果和果肉基質混合標準工作溶液：

稱取10.00g經測定不含氟環唑和多菌靈的空白柑橘全果和果肉樣品，加入40mL提取液(乙腈)，7g氯化鈉，渦旋提取3min，4000rmp離心3min，取上清液；

取1.5mL上述上清液放入預先加有100mg PSA的離心管中，混勻，11000rmp離心3min，準確移取1mL上清液濃縮近干后，用乙腈：水(1:1V/V)定容至2mL，離過0.22μm濾膜，得到空白基質提取凈化液；以空白基質提取凈化液為溶劑配制氟環唑和多菌靈的柑橘全果和果肉基質標準工作溶液；

(2)用超高效液相色譜串聯質譜法測定氟環唑和多菌靈的基質標準工作溶液中農藥組分的提取離子峰面積，以濃度為橫坐標，以提取離子峰面積為縱坐標繪制出氟環唑和多菌靈的標準工作曲線；

其中測定條件為：電離源模式：ESI；電離源極性：正；霧化氣：氮氣；鞘氣壓力：276kPa；離子傳輸管溫度：350℃；噴針溫度：320℃；離子噴霧電壓：3500V；色譜柱HypersilGOLD C18(2.1mm×100mm 1.9μm)，柱溫：35℃；流速：0.3mL/min；進樣量：5μL；其他具體的質譜條件見表1。流動相B為甲醇溶液，流動相C為0.1％甲酸水溶液(v/v)，梯度洗脫條件見表2(表2中流動相B、C兩種溶劑的比例均為體積比)。

表1氟環唑和多菌靈的質譜條件

表2梯度洗脫條件