[發(fā)明專利]一種皮膚成纖維細(xì)胞分離培養(yǎng)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011331103.8
• 申請(qǐng)日: 2020-11-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112375731A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-02-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬雋;崔慧先;郭瑞云;馮寶峰;孔德勝;何晶晶;劉鑫;杜曉峰;馬振環(huán);劉博鑫
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河北醫(yī)科大學(xué);河北多能干細(xì)胞生物技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/071
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/071
• 代理公司: 昆明合盛知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 53210
• 代理人: 龍燕

1.一種皮膚成纖維細(xì)胞分離培養(yǎng)方法，其特征在于：采用胰蛋白酶對(duì)皮膚組織進(jìn)行預(yù)處理，之后將預(yù)處理的組織經(jīng)過(guò)劃痕法固定在培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)，分離成纖維細(xì)胞。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述皮膚成纖維細(xì)胞分離培養(yǎng)方法，其特征在于：胰蛋白酶的質(zhì)量百分比濃度為0.25％-0.5％。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述皮膚成纖維細(xì)胞分離培養(yǎng)方法，其特征在于：胰蛋白酶預(yù)處理的具體過(guò)程為：皮膚組織棄表皮，將真皮部分置于胰蛋白酶中，37℃條件下消化1-3小時(shí)，離心后去上清液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述皮膚成纖維細(xì)胞分離培養(yǎng)方法，其特征在于：預(yù)處理的組織培養(yǎng)過(guò)程所用的培養(yǎng)基為：DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10％胎牛血清+1％NEAA+1％雙抗。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述皮膚成纖維細(xì)胞分離培養(yǎng)方法，其特征在于：預(yù)處理的組織培養(yǎng)過(guò)程的養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度為37℃，體積百分比濃度為5％的CO₂，培養(yǎng)時(shí)間為4-10天。