[發明專利]一種棕櫚酰三肽-1的液相合成方法

在審

• 申請號: 202011326032.2
• 申請日: 2020-11-24
• 公開（公告）號: CN112409444A
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發明（設計）人: 黃毅;邢海英;王志國;虞新友
• 申請（專利權）人: 浙江湃肽生物有限公司
• 主分類號: C07K5/083
• 分類號: C07K5/083;C07K1/02;C07K1/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種棕櫚酰三肽-1的液相合成方法，其特征在于所述方法由以下步驟組成：

（1）合成Boc-Lys（Z）-OBzl

a、取DMF或丙酮溶液加入反應器中，加入Boc-Lys（Z）-OH，再加碳酸鉀，攪拌反應至反應結束；

b、反應完全后，真空抽入水，加入乙酸乙酯萃取兩次，合并有機相打入水洗滌兩次，飽和食鹽水洗滌一次，有機相加入無水硫酸鈉干燥，過濾，乙酸乙酯淋洗，旋干后直接用于下一步反應；

（2）合成H-Lys（Z）-OBzl

開啟攪拌，抽入DCM或THF，稱取MS-OH加入，攪拌均勻后放出至桶中，靜置反應至反應結束，直接用于下一步反；

（3）合成Boc-His-Lys（Z）-OBzl

開啟攪拌，將H-Lys（Z）-OBzl加入反應釜中，抽入DCM，依次加入HOBt，Boc-His-OH，DIEA或NMM，記錄反應液溫度，溫度降至20℃時，通過滴液漏斗將DIC勻速加入反應釜中，待溫度穩定后開啟水浴控溫35℃反應至反應完全；開啟旋蒸蒸干溶劑，真空抽入DMF，攪拌均勻后抽入水，溫度低于25℃時，抽入碳酸鈉固體，攪拌結晶后放出至塑料桶中，靜置后，過濾，加入水，充分攪拌至無塊狀濾餅，洗滌兩次，干燥得到產品；

開啟旋蒸蒸干溶劑，真空抽入DMF，攪拌均勻后抽入水，溫度低于25℃時，抽入碳酸鈉固體，攪拌結晶后放出至塑料桶中，靜置后，過濾，加入水，充分攪拌至無塊狀濾餅，洗滌兩次，干燥得到產品；

（4）合成H-His-Lys（Z）-OBzl

開啟攪拌，向反應釜中加入Boc-His-Lys（Z）-OBzl，真空抽入DCM或THF，使用滴液漏斗加入MS-OH，開啟真空，待Boc-His-Lys（Z）-OBzl基本溶清后，攪拌反應至反應結束，進行下一步；

（5）合成Boc-Gly-His-Lys（Z）-OBzl

真空抽入DCM，依次加入HOBt，Boc-Gly-OH，DIEA6.20，待溫度降至20℃，通過滴液漏斗勻速加入DIC，待溫度穩定后開啟水浴控溫30-40℃反應至反應結束；

旋蒸，真空抽入純化水和DMF，然后加入碳酸鈉固體，攪拌均勻后溫度低于25℃時，結晶后將產品過濾，50%DMF/H2O充分攪拌至無塊狀濾餅，洗滌兩次，然后再用純化水洗滌兩次，干燥得到產品；

（6）合成H-Gly-His-Lys（Z）-OBzl

開啟攪拌加入Boc-Gly-His-Lys（Z）-OBzl，真空抽入DCM或丙酮，使用滴液漏斗勻速加入MS-OH，待Boc-Gly-His-Lys（Z）-OBzl基本溶清后，旋蒸除去部分溶劑，攪拌反應至反應結束；

（7）合成Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl

加入DMF，依次加入HOBt，Pal-OH，NMM或DIEA，待溫度降20℃，加入EDCI，反應至反應結束，加入水攪拌打散，將產品倒入過濾，水洗滌兩次后晾干得到產品；

（8）合成Pal-Gly-His-Lys-OH

開啟攪拌，真空抽入AcOH，丙酮或環己烯，稱取Pal-Gly-His-Lys（Z）-OBzl加入反應釜中，加入甲酸，加入5%濕Pd/C攪拌反應，MS檢測反應完畢后，過濾除去鈀碳，濾液旋蒸除去溶劑，加入甲醇打漿得到產品，過濾干燥得到產品。

2.根據權利要求1所述的一種棕櫚酰三肽-1的液相合成方法，其特征在于：步驟（1）~（8）中均采用TLC板檢測，其中TLC板無原料點即判定反應結束。