[發明專利]用于快速制備感染性RNA病毒的方法在審
| 申請號： | 202011324613.2 | 申請日： | 2015-06-19 |
| 公開（公告）號： | CN112501138A | 公開（公告）日： | 2021-03-16 |
| 發明（設計）人： | F·奧布里;A·努加德雷;G·奎拉特;X·德朗巴勒瑞;E·A·古德;L·德法布里圖斯 | 申請（專利權）人： | ?？怂?馬賽大學;國家醫療保健研究所 |
| 主分類號： | C12N7/01 | 分類號： | C12N7/01 |
| 代理公司： | 北京市金杜律師事務所 11256 | 代理人： | 孟凡宏;袁森 |
| 地址： | 法國*** | 國省代碼： | 暫無信息 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 快速 制備 感染性 rna 病毒 方法 | ||
1.用于在體內制備感染性RNA病毒的方法，包括以下步驟：
a)將DNA依賴性RNA聚合酶的啟動子引入RNA病毒的整個基因組的5’位，和任選地將終止子和RNA聚腺苷酸序列引入RNA病毒的整個基因組的3’位；
b)在至少2個重疊cDNA片段中擴增步驟a)制備的整個病毒基因組，其包括所述啟動子和任選的所述終止子和RNA聚腺苷酸序列；
c’)將所述cDNA片段接種入動物模型；和
e’)從所述動物獲得的生物樣品中回收感染性RNA病毒；
其中所述病毒是單鏈正鏈RNA病毒。
2.權利要求1所述的方法，其中步驟c’)通過腹膜注射、皮內注射或腦內注射進行。
3.權利要求1所述的方法，其中所述動物模型是嚙齒類動物。
4.權利要求1所述的方法，其中所述病毒選自黃病毒、甲病毒和腸道病毒。
5.權利要求4所述的方法，其中：
-所述黃病毒選自日本腦炎病毒(JEV)；西尼羅河病毒(WNV)；登革病毒(DENV)；黃熱病病毒(YFV)；和蜱傳播腦炎病毒(TBEV)；
–所述甲病毒是基孔肯雅病毒；
–所述腸道病毒是柯薩奇病毒。
6.權利要求4所述的方法，其中：
-所述黃病毒選自日本腦炎病毒基因型I菌株(JEV I)或基因型III菌株(JEVIII)；西尼羅河病毒(WNV)基因型2菌株；登革病毒(DENV)血清型4菌株；黃熱病病毒(YFV)野生型菌株；和蜱傳播腦炎病毒(TBEV)遠東亞型菌株；
–所述甲病毒是基孔肯雅病毒；
–所述腸道病毒是柯薩奇B病毒。
7.權利要求1所述的方法，其中：
–所述在5’位的DNA依賴性RNA聚合酶的啟動子是人巨細胞病毒啟動子(pCMV)；和/或
–所述任選的終止子和RNA聚腺苷酸序列分別是丁型肝炎核酶和猿猴病毒40聚腺苷酸信號(HDR/SV40pA)。
8.權利要求1所述的方法，其中步驟b)允許產生2-15個重疊cDNA片段。
9.權利要求1所述的方法，其中所述方法在步驟b)之后且在步驟c)之前進一步包括純化重疊的cDNA片段的步驟b’)。
10.權利要求1所述的方法用于反向基因組學分析的用途。
11.權利要求1所述的方法用于安全有效地運送所述感染性RNA病毒的用途。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于埃克斯-馬賽大學;國家醫療保健研究所，未經埃克斯-馬賽大學;國家醫療保健研究所許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202011324613.2/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
