[發明專利]一種提高透明質酸產量的方法及菌株

有效

• 申請號: 202011317594.0
• 申請日: 2020-11-23
• 公開（公告）號: CN112592930B
• 公開（公告）日: 2023-03-10
• 發明（設計）人: 劉浩;高偉霞;張曉亮;張廣通
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: C12N15/74
• 分類號: C12N15/74;C12N1/21;C12P19/26;C12R1/46
• 代理公司: 天津盛理知識產權代理有限公司 12209
• 代理人: 韓曉梅

1.一種含有用于提高透明質酸產量的遺傳重組質粒的工程菌，其特征在于：所述用于提高透明質酸產量的遺傳重組質粒是將glnA基因插入基因表達載體pSET4S::repA::Ppgk即pLH275的多克隆位點處，構建成功pSET4S:: repA::Ppgk::GlnA即 pLH860；

其中，所述基因表達載體pSET4S::repA::Ppgk的核苷酸序列為SEQ ID NO.2；

所述glnA基因的長度為1382 bp，其反向互補的核苷酸序列為SEQ ID NO.1，該glnA基因始于起始密碼子ATG上游15 bp，結束于終止密碼子TAA下游20 bp；

所述glnA基因來源于獸疫鏈球菌（Streptococcus zooepidemicus) ATCC 39920基因組。

2.根據權利要求1所述的工程菌，其特征在于：所述工程菌的構建方法為：

將用于提高透明質酸產量的遺傳重組質粒轉入宿主菌，構建工程菌；其中，所述宿主菌為獸疫鏈球菌（Streptococcus zooepidemicus）ATCC39920。

3.根據權利要求2所述的工程菌，其特征在于：所述轉入為電轉入。

4.一種利用如權利要求1至3任一項所述的工程菌在提高透明質酸產量方面中的應用。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于：所述應用為在以蔗糖為底物發酵生產透明質酸方面的應用。

6.一種利用如權利要求1至3任一項所述的工程菌高產透明質酸的方法，其特征在于：使用所述工程菌發酵獲得。

7.根據權利要求6所述的利用工程菌高產透明質酸的方法，其特征在于：步驟如下：取工程菌的發酵培養基，按接種量2-8%向發酵培養基中接入工程菌，37℃，pH7.0，轉速150-300r/min，通氣量1.2-1.5 vvm，發酵16-24小時，即得透明質酸；

其中，所述工程菌的發酵培養基為：蔗糖：30-50g/L，酵母提取物：2-3.5g/L，酪蛋白胨：8-10 g/L，NaCl：1-1.5 g/L，K₂HPO₄：2-7 g/L，MgSO₄?7H₂O：0.4-0.6 g/L。