[發明專利]IV膠原蛋白檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202011314642.0
• 申請日: 2020-11-20
• 公開（公告）號: CN112505331A
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發明（設計）人: 沃燕波;宋士強;劉會永
• 申請（專利權）人: 阿里生物技術泰州有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543
• 代理公司: 南京常青藤知識產權代理有限公司 32286
• 代理人: 黃胡生

1.IV膠原蛋白檢測試劑，其特征在于：包括試劑1和試劑2，試劑1組成包含：

2-(N-嗎啉)乙磺酸緩沖液：80-200mM

氯化鈉：20-40g/L

氯化鎂：20-40g/L

氯化鈣：20-40g/L

辛醇硫酸鈉：1-4g/L

氨基丁三醇硫酸十二酯：1-4g/L

疊氮化鈉：0.1g/L

溶劑為純化水，試劑1的PH為5.5～6；

試劑2組成包含：

三(羥甲基)氨基甲烷緩沖液：50-200mM

羊抗人IV型膠原蛋白抗體包被膠乳顆粒：1-3％

二辛基磺化琥珀酸鈉：1-4g/L

月桂酰胺丙基羥磺基甜菜堿：1-4g/L

疊氮化鈉：0.1g/L

溶劑為純化水，試劑2的PH為7.5

其中，試劑2的制備步驟如下：

(1)按照試劑2的組分量依次將二辛基磺化琥珀酸鈉、月桂酰胺丙基羥磺基甜菜堿、疊氮化鈉加入到三(羥甲基)氨基甲烷緩沖溶液中，攪拌均勻后加入小直徑的Ⅳ型膠原蛋白多克隆抗體膠乳顆粒，超聲振動30-45min后，加入溶劑水，繼續攪拌30-45min后用微孔濾膜過濾，保存濾液；

(2)按照試劑2的組分量依次將二辛基磺化琥珀酸鈉、月桂酰胺丙基羥磺基甜菜堿、疊氮化鈉加入到三(羥甲基)氨基甲烷緩沖溶液中，攪拌均勻后加入大直徑的Ⅳ型膠原蛋白多克隆抗體膠乳顆粒，超聲振動30-45min后，加入溶劑水，繼續攪拌30-45min后，利用微孔濾膜過濾，保存濾液；

(3)采用等量遞增法，將含等量上述大直徑膠乳顆粒的溶液滴加到含小直徑膠乳顆粒的溶液中，超聲振動30-45min后，再滴入與上述混合物等量的含大直徑膠乳顆粒的溶液，超聲振動30-45min，如此倍量增加，直至全部混合均勻，即得試劑2溶液。

2.根據權利要求1所述的IV膠原蛋白檢測試劑，其特征在于：試劑2中的羊抗人IV型膠原蛋白抗體包被膠乳顆粒選用兩種膠乳顆粒的混合物，較大直徑的粒徑為200nm～220nm；較小直徑的膠乳顆粒的粒徑在30nm～40nm。

3.根據權利要求1所述的IV膠原蛋白檢測試劑盒，其特征在于：小直徑膠乳顆粒數量∶大直徑膠乳顆粒數量＝1-2:6-7。