[發明專利]棕櫚酰四肽-7的液相合成方法

有效

• 申請號: 202011313502.1
• 申請日: 2020-11-21
• 公開（公告）號: CN112830956B
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發明（設計）人: 李江濤;于更立;卞發財;司呈元;李開慶;劉聰
• 申請（專利權）人: 山東美欣生物科技有限公司
• 主分類號: C07K5/103
• 分類號: C07K5/103;C07K1/06;C07K1/02
• 代理公司: 濟寧匯景知識產權代理事務所(普通合伙) 37254
• 代理人: 朱培

1. 棕櫚酰四肽-7的液相合成方法，其特征在于具體步驟包括：

（1）Boc-Pro-OH的合成

在反應溶劑甲醇中，攪拌下加入脯氨酸和Boc酸酐，控制料溫≤5℃，向料液中滴加三乙胺, 滴加完22-27℃反應12-16h，50-60℃濃縮至干，得到Boc-Pro-OH；

（2）Boc-Pro-OSu的合成

在反應溶劑THF中,攪拌下加入步驟（1）得到的Boc-Pro-OH，降溫至0-5℃，加入HOSu，滴加DCC與THF的混合溶液，滴加完室溫反應2h，過濾，濾液減壓濃縮得到白色固體Boc-Pro-OSu；

（3）Boc-Pro-Arg-OH的合成

在反應溶劑水中，攪拌下加入精氨酸和碳酸氫鈉，并向料液中滴加Boc-Pro-OSu與THF的混合溶液，滴加完25℃反應2h，TLC監控反應完，用濃鹽酸調pH=6.5-7，外浴降溫，控制料液溫度5±2℃攪拌2h，過濾，濾餅真空干燥箱50℃干燥12h，得到Boc-Pro-Arg-OH；

（4）H-Pro-Arg-OH TFA鹽的合成

在反應溶劑TFA中，攪拌下加入步驟（3）得到的Boc-Pro-Arg-OH，25℃反應1h，45℃減壓濃縮，得到H-Pro-Arg-OH TFA鹽；

（5）Pal-Gly-Gln-OH 的合成

在反應溶劑水中，攪拌加入H-Gly-Gln-OH，用30%氫氧化鈉溶液調pH=13，攪拌溶解，控制料溫＜10℃，向料液中滴加Pal-Cl和THF的混合溶液,控制pH=11±0.2,滴加完反應1h，用濃鹽酸調pH=2±0.2，控制料液溫度5±2℃，攪拌半小時后過濾，濾餅50℃真空干燥箱干燥12h，得到Pal-Gly-Gln-OH；

（6）Pal-Gly-Gln-ONp的合成

在反應溶劑DMF中，攪拌下加入步驟（5）得到的Pal-Gly-Gln-OH、HONp、DCC,50℃反應2-2.5h,向料液中滴加水，加完攪拌半小時，過濾，濾餅50℃真空干燥箱干燥12h,得到Pal-Gly-Gln-ONp；

（7）Pal-Gly-Gln-Pro-Arg-OH的合成

在反應溶劑水中，攪拌下加入H-Pro-Arg–OH的TFA鹽、用三乙胺控制pH=8-9,把步驟（6）得到的Pal-Gly-Gln-Pro-ONp和DMF的混合溶液滴加到料液中，控制pH=8-9，滴加完反應2h，TLC監控反應完，用濃鹽酸調pH=2-2.5，外浴降溫，保持料溫5±2℃攪拌2h，過濾,濾餅50℃真空干燥箱干燥14h，得到棕櫚酰四肽-7粗品。

2.根據權利要求1所述的棕櫚酰四肽-7的液相合成方法，其特征在于所述的步驟（7）得到的棕櫚酰四肽-7粗品外浴50℃溶于甲醇，并向料液中滴加乙腈，25℃靜置結晶2-4h，過濾得到產品，50℃真空干燥箱干燥12h，得到棕櫚酰四肽-7。

3.根據權利要求2所述的棕櫚酰四肽-7的液相合成方法，其特征在于所述的棕櫚酰四肽-7粗品：甲醇：乙腈=2g:3ml：6ml-9ml。

4.根據權利要求1-3任意一條所述的棕櫚酰四肽-7的液相合成方法，其特征在于所述的步驟（6）中，DMF：Pal-Gly-Gln-OH：HONp：DCC：水=30ml：4g：1.39g-1.64g：2.24g：100ml。