[發(fā)明專利]一種氨基化合物的衍生化方法及其應(yīng)用

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• 申請日: 2020-11-20
• 公開（公告）號: CN112986412A
• 公開（公告）日: 2021-06-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張曉哲;黃帥;西瓦庫瑪·帕拉尼薩梅;王翼
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 北京元周律知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11540
• 代理人: 張梅娟

1.一種氨基化合物的衍生化方法，其特征在于，所述方法至少包括：

將含有氨基化合物、衍生化試劑的混合物進行衍生化反應(yīng)，得到衍生化產(chǎn)物；

所述衍生化試劑為吡喃鹽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氨基化合物的衍生化方法，其特征在于，所述吡喃鹽為α-活性吡喃鹽。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氨基化合物的衍生化方法，其特征在于，所述吡喃鹽上α位無取代基或所述吡喃鹽上有至少一個取代基；

所述取代基包括C6～C10的芳基、C1～C6的烷基中的至少一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氨基化合物的衍生化方法，其特征在于，所述氨基化合物與衍生化試劑的摩爾比為1:1～1000；

優(yōu)選地，所述衍生化反應(yīng)的條件包括：反應(yīng)溫度為20～90℃；反應(yīng)時間為0.5～4h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氨基化合物的衍生化方法，其特征在于，所述混合物中還包括催化劑；

所述催化劑在所述混合物中的濃度為100μmol/L～100mmol/L；

所述催化劑為三乙胺、TEAA緩沖液中的至少一種；

優(yōu)選地，所述TEAA緩沖液pH為6～11；

優(yōu)選地，所述混合物中還包括溶劑；

所述氨基化合物與溶劑的摩爾體積比為0.5nmol/L～1mmol/L；

所述溶劑選自水、乙腈、乙醇、甲醇、DMSO、二甲基甲酰胺、四氫呋喃中的至少一種。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氨基化合物的衍生化方法，其特征在于，所述氨基化合物為單胺類神經(jīng)遞質(zhì)、多肽、氨基酸中的至少一種。

7.一種氨基化合物的定性/定量分析方法，其特征在于，所述分析方法至少包括以下步驟：

步驟1、對氨基化合物進行衍生化處理，得到衍生化產(chǎn)物；

所述衍生化處理方法為權(quán)利要求1-6任一項所述的衍生化方法；

步驟2、對所述衍生化產(chǎn)物進行液相色譜-質(zhì)譜分析。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的氨基化合物的定性/定量分析方法，其特征在于，所述液相色譜-質(zhì)譜分析還包括：

將液相色譜-質(zhì)譜分析結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)曲線對照，獲得氨基化合物的含量；

優(yōu)選地，所述標(biāo)準(zhǔn)曲線的獲得方法包括：

將氨基化合物的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)加入溶劑B，配制成系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；

將含有衍生化試劑的原料加入到含有氨基化合物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的溶液中進行衍生化反應(yīng)，得到衍生化產(chǎn)物；

對所述衍生化產(chǎn)物進行液相色譜-質(zhì)譜分析，得到衍生化產(chǎn)物所對應(yīng)的峰面積；

對所述衍生化產(chǎn)物所對應(yīng)的峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度作回歸分析，得到物質(zhì)濃度與峰面積的關(guān)系曲線。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的氨基化合物的定性/定量分析方法，其特征在于，所述溶劑B選自乙腈、乙醇、甲醇、DMSO、二甲基甲酰胺、四氫呋喃中的至少一種；

優(yōu)選地，所述液相色譜條件為：

流動相A為體積百分?jǐn)?shù)0.1％的甲酸，流動相B為體積百分?jǐn)?shù)為100％乙腈；

洗脫梯度：0～10min，5～100％B；10～13min，100％B；13～13.1min，100～5％B；13.1～16min，5％B；

優(yōu)選地，所述質(zhì)譜分析采用電噴霧電離源正離子模式；

進一步優(yōu)選地，所述質(zhì)譜分析為二級質(zhì)譜分析；

更進一步優(yōu)選地，所述二級質(zhì)譜分析中，CID模式能量范圍為10～40eV。

10.權(quán)利要求1-6任一項所述氨基化合物的衍生化方法、權(quán)利要求7-9任一項所述氨基化合物的定性/定量分析方法在多肽或/和蛋白質(zhì)測序中的應(yīng)用。