[發明專利]CrePR1-P2A與CrePR1-IERS2質粒構建效率的比較方法在審
| 申請號： | 202011311169.0 | 申請日： | 2020-11-20 |
| 公開（公告）號： | CN112391411A | 公開（公告）日： | 2021-02-23 |
| 發明（設計）人： | 林鍇珺 | 申請（專利權）人： | 林鍇珺 |
| 主分類號： | C12N15/85 | 分類號： | C12N15/85 |
| 代理公司： | 深圳新創友知識產權代理有限公司 44223 | 代理人： | 江耀純 |
| 地址： | 364102 福*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | crepr1 p2a iers2 質粒 構建 效率 比較 方法 | ||
【權利要求書】：
1.CrePR1-P2A與CrePR1-IERS2質粒構建效率的比較方法，其特征在于：
在細胞系NIH3T3中轉染mROSA-LSL-EGFP質粒，并且同時轉染LScKO-SG-CrePR1-IERS2-tdtomato或LScKO-SG-CrePR1-P2A-tdtomato，在RU486米非司酮誘導下激活PR1孕激素受體，即可激活轉染有兩個質粒的細胞內mTmG體系，從而可以進行P2A與IERS2的體系比較。
2.根據權利要求1所述的CrePR1-P2A與CrePR1-IERS2質粒構建效率的比較方法，其特征在于：所述的轉染成功的細胞在溶解有2.33umol/ml RU486藥物米非司酮的二甲亞砜中激活PR1孕激素受體。
3.根據權利要求1所述的CrePR1-P2A與CrePR1-IERS2質粒構建效率的比較方法，其特征在于：進行P2A與IERS2的體系比較后，決定在構建轉基因的蛋白連接域中連接哪一個連接域。
4.根據權利要求1所述的CrePR1-P2A與CrePR1-IERS2質粒構建效率的比較方法，其特征在于：通過用膜蛋白中表達mT的新生鼠即mTmG小鼠來分表皮，建立mTmG纖維細胞。
5.根據權利要求1所述的CrePR1-P2A與CrePR1-IERS2質粒構建效率的比較方法，其特征在于：所述細胞系NIH3T3在傳代之后轉染質粒。
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