[發(fā)明專利]消除PCR熒光基線期波動的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011310533.1
• 申請日: 2020-11-20
• 公開（公告）號: CN112331266A
• 公開（公告）日: 2021-02-05
• 發(fā)明（設計）人: 付坤明;劉聰;王超;侯劍平;劉耀基;李振坤;包瑞飛;張棟
• 申請（專利權）人: 安圖實驗儀器（鄭州）有限公司
• 主分類號: G16B25/20
• 分類號: G16B25/20;G16B40/10
• 代理公司: 鄭州異開專利事務所(普通合伙) 41114
• 代理人: 韓華

1.一種消除PCR熒光基線期波動的方法，其特征在于：包含下述步驟：

步驟1，在實時熒光定量PCR反應中，采集熒光信號數(shù)據(jù)集，所述數(shù)據(jù)集包含多個數(shù)據(jù)點；將每個所述數(shù)據(jù)點與設定的順序號一一對應，使得每一個數(shù)據(jù)點分別對應平面坐標系中的一個坐標點（x，y），其中，x值表示實時熒光PCR循環(huán)數(shù)，y值表示測得的熒光信號值，所述熒光信號值包含發(fā)光值、吸光度；

步驟2，通過使用數(shù)據(jù)擬合方法應用于函數(shù)模型，計算求出函數(shù)模型中的參數(shù)值a,b,c,d,e，得到函數(shù)表達式如下：

；

步驟3，對所述函數(shù)表達式進行處理，求出熒光信號值達到指數(shù)擴增時的循環(huán)周期數(shù)Ct值。

2.根據(jù)權利要求1所述消除PCR熒光基線期波動的方法，其特征在于：所述數(shù)據(jù)擬合步驟為：

步驟2.1，設置初始值：

a選取所述數(shù)據(jù)集中的第一個y值；

b選取1；

c選取數(shù)據(jù)集中x值的中位數(shù)或均值或最小數(shù)或最大數(shù)；

d選取數(shù)據(jù)集中最后一個y值；

e選取1；

步驟2.2，設置搜索方向：

包含最速下降法、Gauss-NewTon法、Levenberg-Marquardt法、約束優(yōu)化的搜索方法；

步驟2.3，終止條件：包含迭代的次數(shù)、誤差和的限值、兩次相鄰迭代系數(shù)最大差值的限值條件中的一個或者多個。

3.根據(jù)權利要求1或2所述消除PCR熒光基線期波動的方法，其特征在于：提高計算Ct準確度；

計算所述Ct值的方法為：將y值設為任意熒光信號水平時，帶入所述函數(shù)表達式，根據(jù)函數(shù)求根方法計算所得x值即為Ct值。