[發明專利]利用液態熱響應型聚合物EO20 在審
| 申請號： | 202011307539.3 | 申請日： | 2020-11-20 |
| 公開（公告）號： | CN112321704A | 公開（公告）日： | 2021-02-05 |
| 發明（設計）人： | 曹學君;萬俊芬;陳曦 | 申請（專利權）人： | 華東理工大學 |
| 主分類號： | C07K16/00 | 分類號： | C07K16/00;C07K1/14 |
| 代理公司： | 上海智信專利代理有限公司 31002 | 代理人： | 王潔;豆欣欣 |
| 地址： | 200237 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 利用 液態 響應 聚合物 eo base sub 20 | ||
【權利要求書】：
1.一種利用液態熱響應型聚合物EO20PO80分離純化單克隆抗體的方法，其特征在于，所述的方法包括：
正向萃取步驟：將EO20PO80與單克隆抗體細胞培養液按照1:3的體積比混合均勻，并調節pH至9.0，靜置于40℃水浴鍋30分鐘后，即可分成上下界面清晰的兩相，取出離心，并將上相萃余液去除；
反向萃取步驟：加入與正向萃取步驟中的下相等體積的25mM檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖體系，并加入正向萃取步驟中加入的EO20PO80等體積的水，混合均勻并調節pH至4.5，靜置于40℃水浴鍋，直至形成上下界面清晰的兩相，經過反向萃取，單克隆抗體富集于上相水溶液中。
2.根據權利要求1所述的利用液態熱響應型聚合物EO20PO80分離純化單克隆抗體的方法，其特征在于，所述的單克隆抗體為利妥昔單克隆抗體或曲妥珠單克隆抗體。
3.根據權利要求1所述的利用液態熱響應型聚合物EO20PO80分離純化單克隆抗體的方法，其特征在于，反向萃取步驟得到的下相，放置于50℃中按照1:1體積比加入0.1MNaOH溶液，加熱30分鐘，除去殘留在EOPO中的雜質，回收熱響應型聚合物EO20PO80。
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