[發(fā)明專利]檢測(cè)貓胰腺炎的熒光免疫層析試劑盒及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011300071.5
• 申請(qǐng)日: 2020-11-19
• 公開（公告）號(hào): CN112485420B
• 公開（公告）日: 2022-11-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 梁才弗;王偉;鄧艷珍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 海衛(wèi)特（廣州）醫(yī)療科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/558
• 分類號(hào): G01N33/558;G01N33/58;G01N33/577;G01N33/573
• 代理公司: 華進(jìn)聯(lián)合專利商標(biāo)代理有限公司 44224
• 代理人: 戴志攀

本發(fā)明涉及一種檢測(cè)貓胰腺炎的熒光免疫層析試劑盒及其制備方法，包括熒光標(biāo)記組分和免疫層析試紙條。本發(fā)明的熒光免疫層析試劑盒利用熒光免疫層析技術(shù)以貓胰脂肪酶單克隆抗體定量檢測(cè)貓胰腺炎，不僅填補(bǔ)了目前市場(chǎng)上沒(méi)有熒光免疫層析定量檢測(cè)貓胰腺炎的空白，同時(shí)也提高了檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確度，并且將定量檢測(cè)時(shí)間大大縮短，具有快速、簡(jiǎn)單、干擾小等優(yōu)點(diǎn)。而且本發(fā)明針對(duì)貓胰腺炎的檢測(cè)將試劑盒進(jìn)行了改進(jìn)，取消了試紙條上的結(jié)合墊，增加熒光標(biāo)記組分的提供，可以將待測(cè)樣本與熒光標(biāo)記組分混合后加至樣品墊進(jìn)行測(cè)試，可以提高反應(yīng)的均一性，從而達(dá)到更高的精密度和準(zhǔn)確度。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及免疫層析技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種檢測(cè)貓胰腺炎的熒光免疫層析試劑盒及其制備方法。

背景技術(shù)

胰腺炎分為急性胰腺炎和慢性胰腺炎。急性胰腺炎是指腺體細(xì)胞被激活的胰腺急性疾病。目前，國(guó)內(nèi)外的獸醫(yī)臨床上對(duì)急性胰腺炎的診斷主要是依靠體檢和實(shí)驗(yàn)室診斷相結(jié)合。但是大量臨床數(shù)據(jù)顯示對(duì)于貓胰腺炎的診斷特異性和敏感性都不強(qiáng)，無(wú)法單純通過(guò)這些方法對(duì)急性胰腺炎進(jìn)行確診。目前在中國(guó)獸醫(yī)臨床上用于診斷貓胰腺炎的實(shí)驗(yàn)方法主要是測(cè)量血漿淀粉酶，但是淀粉酶波動(dòng)范圍較大，貓的品種之間也具有較大的差異性。

目前檢測(cè)貓胰腺炎的免疫學(xué)方法主要有金標(biāo)免疫滲濾法(金標(biāo)法)、化學(xué)發(fā)光法、分子診斷法(PCR)等。但是金標(biāo)免疫滲濾法(金標(biāo)法)靈敏度不高，重復(fù)性和準(zhǔn)確性均有欠缺，抗干擾能力不足，檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，致使臨床價(jià)值受到很大的限制?；瘜W(xué)發(fā)光法、分子診斷法需要大型儀器，而且對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的要求較高，在寵物醫(yī)院難以普及。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，有必要提供一種準(zhǔn)確度較高的檢測(cè)貓胰腺炎的熒光免疫層析試劑盒。

一種檢測(cè)貓胰腺炎的熒光免疫層析試劑盒，包括熒光標(biāo)記組分和免疫層析試紙條；

所述熒光標(biāo)記組分中含有海藻糖、BSA、蔗糖、月桂醇醚磷酸酯鉀以及熒光微球標(biāo)記的貓胰脂肪酶單克隆檢測(cè)抗體和熒光微球標(biāo)記的第一質(zhì)控抗體；

所述免疫層析試紙條包括底板和設(shè)于所述底板上的樣品墊、反應(yīng)膜和吸水墊，所述樣品墊、反應(yīng)膜和吸水墊依次搭接，所述反應(yīng)膜上設(shè)有相互間隔的檢測(cè)線及質(zhì)控線，所述檢測(cè)線較所述質(zhì)控線更靠近所述樣品墊，所述檢測(cè)線上包被有貓胰脂肪酶單克隆捕獲抗體，所述質(zhì)控線包被有能夠與所述第一質(zhì)控抗體特異性結(jié)合的第二質(zhì)控抗體。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述熒光標(biāo)記組分中各物質(zhì)的濃度為：海藻糖0.5wt％～3wt％、BSA 2wt％～7wt％，蔗糖5wt％～20wt％、月桂醇醚磷酸酯鉀0.1wt％～2wt％、熒光微球標(biāo)記的貓胰脂肪酶單克隆檢測(cè)抗體5wt％～15wt％、熒光微球標(biāo)記的第一質(zhì)控抗體5wt％～15wt％。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述第一質(zhì)控抗體為羊抗兔IgG抗體，所述第二質(zhì)控抗體為兔IgG抗體。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述熒光微球?yàn)闊晒饽z乳微球。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述熒光微球的直徑為300mm～500nm，所述熒光微球在300nm～500nm的激發(fā)光光源作用下，發(fā)射出500nm～600nm的熒光。

本發(fā)明還提供了一種所述熒光免疫層析試劑盒的制備方法，包括以下步驟：

將所述海藻糖、BSA、蔗糖、月桂醇醚磷酸酯鉀、熒光微球標(biāo)記的貓胰脂肪酶單克隆檢測(cè)抗體、熒光微球標(biāo)記的第一質(zhì)控抗體與緩沖液混合得到所述熒光標(biāo)記組分；

將貓胰脂肪酶單克隆捕獲抗體包被在反應(yīng)膜上形成所述檢測(cè)線；

將第二質(zhì)控抗體包被在所述反應(yīng)膜上形成與所述檢測(cè)線相間隔的所述質(zhì)控線；

將所述樣品墊、所述反應(yīng)膜和所述吸水墊設(shè)于所述底板上，得到所述免疫層析試紙條。