[發明專利]檢測貓胰腺炎的熒光免疫層析試劑盒及其制備方法

有效

• 申請號: 202011300071.5
• 申請日: 2020-11-19
• 公開（公告）號: CN112485420B
• 公開（公告）日: 2022-11-15
• 發明（設計）人: 梁才弗;王偉;鄧艷珍
• 申請（專利權）人: 海衛特（廣州）醫療科技有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/58;G01N33/577;G01N33/573
• 代理公司: 華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 戴志攀

1.一種檢測貓胰腺炎的熒光免疫層析試劑盒，其特征在于，包括熒光標記組分和免疫層析試紙條；

所述熒光標記組分中含有海藻糖、BSA、蔗糖、月桂醇醚磷酸酯鉀以及熒光微球標記的貓胰脂肪酶單克隆檢測抗體和熒光微球標記的第一質控抗體；所述熒光標記組分中各物質的濃度為：海藻糖0.5wt％～3wt％、BSA 2wt％～7wt％，蔗糖5wt％～20wt％、月桂醇醚磷酸酯鉀0.1wt％～2wt％、熒光微球標記的貓胰脂肪酶單克隆檢測抗體5wt％～15wt％、熒光微球標記的第一質控抗體5wt％～15wt％；

所述免疫層析試紙條包括底板和設于所述底板上的樣品墊、反應膜和吸水墊，所述樣品墊、反應膜和吸水墊依次搭接，所述反應膜上設有相互間隔的檢測線及質控線，所述檢測線較所述質控線更靠近所述樣品墊，所述檢測線上包被有貓胰脂肪酶單克隆捕獲抗體，所述質控線包被有能夠與所述第一質控抗體特異性結合的第二質控抗體。

2.根據權利要求1所述的熒光免疫層析試劑盒，其特征在于，所述第一質控抗體為羊抗兔IgG抗體，所述第二質控抗體為兔IgG抗體。

3.根據權利要求1所述的熒光免疫層析試劑盒，其特征在于，所述熒光微球為熒光膠乳微球。

4.根據權利要求3所述的熒光免疫層析試劑盒，其特征在于，所述熒光微球的直徑為300mm～500nm，所述熒光微球在300nm～500nm的激發光光源作用下，發射出500nm～600nm的熒光。

5.一種權利要求1～4任一項所述的熒光免疫層析試劑盒的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

將所述海藻糖、BSA、蔗糖、月桂醇醚磷酸酯鉀、熒光微球標記的貓胰脂肪酶單克隆檢測抗體、熒光微球標記的第一質控抗體與緩沖液混合得到所述熒光標記組分；

將貓胰脂肪酶單克隆捕獲抗體包被在反應膜上形成所述檢測線；

將第二質控抗體包被在所述反應膜上形成與所述檢測線相間隔的所述質控線；

將所述樣品墊、所述反應膜和所述吸水墊設于所述底板上，得到所述免疫層析試紙條。

6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，在反應膜上形成所述檢測線的方法包括以下步驟：用含2wt％～10wt％海藻糖的緩沖液將貓胰脂肪酶單克隆捕獲抗體稀釋到0.3mg/mL～1mg/mL，作為檢測線工作液；用所述檢測線工作液在反應膜上劃線后烘干，形成所述檢測線。

7.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，在反應膜上形成所述質控線的方法包括以下步驟：用含2wt％～10wt％蔗糖的緩沖液將第二質控抗體稀釋到0.3mg/mL～1mg/mL，作為質控線工作液；用所述質控線工作液在反應膜上劃線后烘干，形成所述質控線。

8.根據權利要求6或7所述的制備方法，其特征在于，所述劃線的出液量為0.5μL/cm～2μL/cm，所述烘干的條件為40℃～60℃烘48～72小時。

9.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述熒光微球標記的貓胰脂肪酶單克隆檢測抗體的制備方法包括以下步驟：將熒光微球活化得到活化熒光微球溶液，然后加入貓胰脂肪酶單克隆檢測抗體室溫孵育1.5～3小時。