[發(fā)明專利]BRAFV600E

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011299529.X
• 申請日: 2020-11-18
• 公開（公告）號: CN112322738A
• 公開（公告）日: 2021-02-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄭仲征;杜可明;袁志陽;徐祥;邵文涵
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳荻碩貝肯精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)有限公司;上海荻碩貝肯醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司;上海荻碩貝肯生物科技有限公司;上海荻碩貝肯基因科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 深圳市恒程創(chuàng)新知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44542
• 代理人: 張小容

1.一種BRAF^V600E突變比例檢測試劑盒，其特征在于，包括：

引物一，核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；

引物二，核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；

探針一，包括如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列一和分別連接所述核苷酸序列一5’端的熒光基團(tuán)和3’端的淬滅基團(tuán)；以及

探針二，包括如SEQ ID No.4所示的核苷酸序列二和分別連接所述核苷酸序列二5’端的熒光基團(tuán)和3’端的淬滅基團(tuán)。

2.如權(quán)利要求1所述的BRAF^V600E突變比例檢測試劑盒，其特征在于，所述核苷酸序列一的5’端連接FAM熒光基團(tuán)，所述核苷酸序列一的3’端連接MGB淬滅基團(tuán)；所述核苷酸序列二的5’端連接HEX熒光基團(tuán)，所述核苷酸序列二的3’端連接MGB淬滅基團(tuán)。

3.一種BRAF^V600E突變比例檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)獲得待測樣品，并提取待測樣品的ctDNA；

(2)利用引物一、引物二、探針一和探針二，以步驟(1)中獲取的所述ctDNA為模板，進(jìn)行數(shù)字PCR擴增，并掃描FAM與HEX通道熒光信號；

(3)利用步驟(2)中FAM與HEX通道的熒光信號，計算不同通道的核酸拷貝數(shù)，獲得基因位點的突變比例；

其中，所述引物一的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述引物二的核苷酸序列如SEQID No.2所示；所述探針一包括如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列一和分別連接所述核苷酸序列一5’端的熒光基團(tuán)和3’端的淬滅基團(tuán)；所述探針二包括如SEQ ID No.4所示的核苷酸序列二和分別連接所述核苷酸序列二5’端的熒光基團(tuán)和3’端的淬滅基團(tuán)。

4.如權(quán)利要求3所述的BRAF^V600E突變比例檢測方法，其特征在于，所述核苷酸序列一的5’端連接FAM熒光基團(tuán)，所述核苷酸序列一的3’端連接MGB淬滅基團(tuán)；所述核苷酸序列二的5’端連接HEX熒光基團(tuán)，所述核苷酸序列二的3’端連接MGB淬滅基團(tuán)。