[發明專利]一種DNP-BSA聚合度的質控方法有效
| 申請號： | 202011297476.8 | 申請日： | 2020-11-18 |
| 公開（公告）號： | CN112526123B | 公開（公告）日： | 2022-05-24 |
| 發明（設計）人： | 張濤;巢姍;周國棟;盛布恩 | 申請（專利權）人： | 廈門同仁心生物技術有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/558 | 分類號： | G01N33/558;G01N33/543;G01N33/577 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 361000 福建省廈門市海滄區翁角西*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 dnp bsa 聚合 方法 | ||
1.一種DNP-BSA聚合度的質控方法，其特征在于，包括以下步驟：
S1、噴金墊的制備：（A）在0.5-1.5ml濃度為0.02-0.06%的膠體金溶液中加入1-3μl濃度為2M的碳酸鉀溶液混勻，然后加入10-30μg的DNP-BSA在旋轉混合儀上室溫混合15-20min；
（B）加入10-30%的BSA溶液5-15μl混合20-30min，以8000-12000rpm的轉速離心3-10min；
（C）棄上清，加入50-150μl的復溶液，吹打混勻；
（D）加入450-1200μl的干燥液，混勻后加入到噴金墊（4）上；
S2、包被膜的制備：通過點噴方式將檢測抗體間隔包被在包被膜（2）上形成檢測線（3），在包被膜（2）上按樣品層析方向間隔設置有至少兩條檢測線（3）；
S3、檢測試紙條的制備：將包被膜（2）和樣品墊（5）、噴金墊（4）、吸收墊（6）黏接在一起并固定在基片區（1）上；
S4、在樣品墊（5）上滴加60-120μl緩沖液，靜置600s，觀察結果；
所述檢測抗體包括鼠抗人DNP單克隆或多克隆抗體、兔抗人DNP單克隆或多克隆抗體和羊抗人DNP單克隆或多克隆抗體；
所述復溶液為含有5%的BSA和0.05%的PEG20000濃度為10mM的Tris緩沖液，所述復溶液的pH為8-9；
所述干燥液為含有0.5%的酪蛋白和0.1%的吐溫20濃度為10mM的 Tris緩沖液，所述干燥液的pH為8。
2.根據權利要求1所述的一種DNP-BSA聚合度的質控方法，其特征在于，所述檢測線（3）的數量為三條。
3.根據權利要求1所述的一種DNP-BSA聚合度的質控方法，其特征在于，所述檢測線（3）的數量為兩條。
4.根據權利要求1所述的一種DNP-BSA聚合度的質控方法，其特征在于，相鄰所述檢測線（3）之間的距離為3-9mm。
5.根據權利要求1所述的一種DNP-BSA聚合度的質控方法，其特征在于，所述檢測線（3）為檢測抗體通過劃膜噴金一體機以0.8-1.5μL/cm的噴涂速度噴涂在包被膜（2）上干燥后得到的。
6.根據權利要求1所述的一種DNP-BSA聚合度的質控方法，其特征在于，所述包被膜（2）為硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜；吸收墊（6）為吸水濾紙制成；樣品墊（5）和噴金墊（4）由玻璃纖維棉制成；基片區（1）選用聚乙烯底板、聚氯乙烯底板、聚丙烯底板或聚苯乙烯底板中的一種。
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