[發明專利]篩選靶細胞的方法、試劑盒及其用途

在審

• 申請號: 202011297134.6
• 申請日: 2020-11-18
• 公開（公告）號: CN112326964A
• 公開（公告）日: 2021-02-05
• 發明（設計）人: 高曉航;魏雨
• 申請（專利權）人: 南京利康立德生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;C07K16/00
• 代理公司: 北京景聞知識產權代理有限公司 11742
• 代理人: 張強

1.一種篩選靶細胞的方法，所述靶細胞適于分泌目標分子，其特征在于，包括：

在適于分泌目標分子的條件下，在培養腔室中，對所述候選單細胞進行培養，其中，所述培養腔室中設置有信號篩選層，所述信號篩選層覆蓋所述單細胞，所述信號篩選層含有特異性識別所述目標分子的信號分子；和

基于所述信號篩選層中所述信號分子的信號，選擇適于分泌所述目標分子的靶細胞。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述信號篩選層設置在培養腔室的基體材料中；

所述信號篩選層設置在培養基中；

所述信號篩選層含有抗體、探針的至少之一；

所述信號篩選層是由水凝膠形成的；或者

所述基體材料的機械強度高于所述信號篩選層的機械強度。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述培養腔室設置在生物培養芯片上，所述生物培養芯片包括：

基體，所述基體由基體材料形成；和

微孔，所述微孔形成在所述基體的表面，并且所述微孔在所述基體的表面開口，并且所述微孔限定出所述培養腔室。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述微孔在所述基體構成預定的陣列圖形。

5.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述基體材料所述基體材料具有大約1.25～大約1.75的平衡溶脹率。

6.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述微孔的開口直徑為8-25微米，深度為15-35微米。

7.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述基體材料包括選自膠原水凝膠、甲基化纖維素、瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠等的至少之一。

8.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，至少兩個相鄰的所述微孔的間距為10～50微米。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述信號分子為熒光分子。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述熒光分子包括FITC、AF488的至少之一。

11.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，利用熒光顯微鏡，對陽性細胞進行定位。

12.一種試劑盒，其特征在于，包括：

水凝膠；

信號分子；和

生物培養芯片。

13.一種制備抗體的方法，其特征在于，包括：

利用權利要求1～11任一項所述的方法，篩選目標細胞；

使所述目標細胞進行擴增和表達抗體。

14.一種篩選單克隆抗體的方法，其特征在于，包括：

將多個雜交瘤細胞分配在所述生物培養芯片上，其中，每個所述腔室中每個所述培養腔室中含有至多一個所述雜交瘤細胞；

根據權利要求1～11所述的方法，選擇陽性雜交瘤細胞；

分離所述陽性雜交瘤細胞；

對所述陽性雜交瘤細胞進行培養和抗體表達，以便獲得單克隆抗體。

15.一種單克隆抗體，其是通過權利要求14所述的方法獲得的。

16.一種抗體-抗原復合物，其特征在于，所述抗體為權利要求15所述的單克隆抗體，所述單克隆抗體上連接有信號分子。

17.一種篩選抗體的方法，其特征在于，包括：

(1)在適于候選細胞表達抗體的條件下，將所述候選細胞置于培養腔室中培養預定時間；

(2)在所述培養腔室中，添加信號抗體-抗原復合物，所述信號抗體連接有信號分子，所述信號抗體為權利要求15所述的單克隆抗體；和

(3)基于所述信號分子的信號，確定所述候選細胞是否為目標細胞，所述目標細胞分泌與所述單克隆抗體具有不同抗原決定簇的抗體。