[發明專利]一類基于半胱氨酸-多胺-嗎啉修飾的量子點溶酶體靶向熒光探針及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202011292021.7
• 申請日: 2020-11-18
• 公開（公告）號: CN112375562A
• 公開（公告）日: 2021-02-19
• 發明（設計）人: 趙美霞;任斌;楊曉靜;甘瑩;李景華;姚文靜;張志強
• 申請（專利權）人: 河南大學
• 主分類號: C09K11/02
• 分類號: C09K11/02;C09K11/06;C09K11/88;C07D295/13;G01N21/64
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 楊海霞

1.一類基于半胱氨酸-多胺-嗎啉修飾的量子點溶酶體靶向熒光探針，其特征在于，具有如下通式：

；

其中，n取0，1或2；m取0或1；QDs代表量子點。

2.如權利要求1所述基于半胱氨酸-多胺-嗎啉修飾的量子點溶酶體靶向熒光探針，其特征在于，所述量子點為CdSe、CdSe/ZnS或CdSe/CdS。

3.權利要求1或2所述基于半胱氨酸-多胺-嗎啉修飾的量子點溶酶體靶向熒光探針的制備方法，其特征在于，將配體溶解于水中，然后加入含量子點的氯仿溶液，用三乙醇胺調節pH值大于10，超聲反應2-6 h，反應完成時紅色的量子點從下層有機相轉入上層水相，取上層水相加入乙酸乙酯，離心棄去上清，得到固體沉淀，經洗滌、干燥即得；

所述配體為或或。

4.如權利要求3所述基于半胱氨酸-多胺-嗎啉修飾的量子點溶酶體靶向熒光探針的制備方法，其特征在于，量子點與配體的質量比為1：9-11。

5.如權利要求3所述基于半胱氨酸-多胺-嗎啉修飾的量子點溶酶體靶向熒光探針的制備方法，其特征在于，所述配體

經下述步驟制備獲得：

1）將N-(3-氨丙基)嗎啉溶于乙腈，加入K₂CO₃和N-(3-溴丙基)鄰苯二甲酰亞胺，反應過夜，蒸出溶劑，加入體積比1:1的CH₂Cl₂和10%Na₂CO₃萃取，取有機層用無水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑得到黃色油狀物2；或者將N-(3-氨丙基)嗎啉溶于乙腈，加入K₂CO₃和N-(4-溴丁基)鄰苯二甲酰亞胺，反應過夜，蒸出溶劑，加入體積比1:1的CH₂Cl₂和10%Na₂CO₃萃取，取有機層用無水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑，得到黃色油狀物7；

2）將黃色油狀物2或7溶解于甲醇中，加入(Boc)₂O，室溫下攪拌反應過夜，蒸干溶劑，用硅膠柱純化分離，以體積比20:1的CH₂Cl₂-CH₃OH作為洗脫液，蒸干溶劑，得油狀物3；

3）將油狀物3溶于無水乙醇中，加入水合肼，室溫攪拌反應過夜，蒸干溶劑，加入體積比1:1的CH₂Cl₂和10%Na₂CO₃萃取，取有機層用無水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑得中間體4；

4）制備化合物5：

將N-叔丁氧羰基-S-三苯甲基-D-半胱氨酸和N-羥基丁二酰亞胺溶于乙腈中，冰浴條件下，加入1,2-二氯乙烷，攪拌2-4 h，然后在N₂保護下反應10-16 h，過濾，蒸干，加入CH₂Cl₂溶解，用蒸餾水進行萃取，取有機相用無水硫酸鈉干燥，蒸干得白色泡沫狀固體化合物12；

將化合物12與中間體4混合，加入NaHCO₃，50-70℃油浴條件下攪拌10-16 h，蒸出溶劑，加入適量水溶解，然后加入CH₂Cl₂ 萃取，取有機層用無水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑，用硅膠柱純化分離，以體積比20:1的CH₂Cl₂-CH₃OH作為洗脫液，得到黃色油狀物中間體化合物5；

5）將化合物5溶于CH₂Cl₂，冰浴條件下抽真空，氮氣保護，注入氟乙酸和三乙基硅烷，撤去冰浴，反應4-8 h，蒸干溶劑，加入適量水溶解，然后加入二氯甲烷萃取，取水層，蒸出溶劑即得。