[發明專利]一種靶向HER2的CAR-T表達載體及其構建和應用

在審

• 申請號: 202011287019.0
• 申請日: 2020-11-17
• 公開（公告）號: CN112391414A
• 公開（公告）日: 2021-02-23
• 發明（設計）人: 王春梅;夏容華;曹雪濤
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院基礎醫學研究所
• 主分類號: C12N15/867
• 分類號: C12N15/867;C12N15/62;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 趙徐平

1.一種靶向HER2的CAR-T表達載體，其特征在于，

所述CAR-T表達載體包含靶向HER2的嵌合抗原受體基因序列；

所述靶向HER2的嵌合抗原受體包括依次連接的：CD8α信號肽、靶向HER2的單鏈抗體、CD8α鉸鏈區、CD8α跨膜區、共刺激因子4-1BB、CD3ζ胞內信號肽、P2A連接肽、PD1信號肽、PD1胞外域、CD28跨膜域以及CD28胞質信號域。

2.根據權利要求1所述的一種靶向HER2的CAR-T表達載體，其特征在于，

CD8α信號肽核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

靶向HER2的單鏈抗體輕鏈VL核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；

靶向HER2的單鏈抗體鉸鏈Linker核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；

靶向HER2的單鏈抗體重鏈VH核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；

CD8α鉸鏈區核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；

CD8α跨膜區核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；

共刺激因子4-1BB核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；

CD3ζ胞內信號肽核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；

P2A連接肽核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；

PD1信號肽核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示；

PD1胞外域核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示；

CD28跨膜域核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示；

CD28胞質信號域核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示。

3.權利要求1或2所述的一種靶向HER2的CAR-T表達載體的構建方法，其特征在于，以靶向HER2的嵌合抗原受體基因為目的基因，利用重組慢病毒包裝系統，構建獲得靶向HER2的CAR-T表達載體。

4.一種CAR-T細胞，其特征在于，

所述CAR-T細胞為使用權利要求1或2所述的CAR-T表達載體轉導T淋巴細胞獲得。

5.權利要求1或2所述的CAR-T表達載體或權利要求4所述CAR-T細胞在制備抗腫瘤藥物中的應用。

6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，

所述腫瘤為HER2過表達腫瘤。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，

所述腫瘤包括HER2陽性乳腺癌。