[發明專利]一種消化染色液及結晶紫染色細胞核計數方法

在審

• 申請號: 202011280605.2
• 申請日: 2020-11-16
• 公開（公告）號: CN112393961A
• 公開（公告）日: 2021-02-23
• 發明（設計）人: 梁智杰;黃林;崔利凱;李高軍
• 申請（專利權）人: 成都柏奧特克生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/30;G01N15/10
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 張娟;鄭勇力

1.一種消化染色液，其特征在于，其是包括結晶紫、檸檬酸與曲拉通X-100的混合溶液。

2.按照權利要求2所述的一種消化染色液，其特征在于，其是溶解有如下組分的水溶液：

結晶紫1.00～1.5g/L；

檸檬酸20～21.00g/L；

曲拉通X-100 1.00～1.5ml/L；

優選的，其是溶解有如下組分的水溶液：

結晶紫1.00g/L；

檸檬酸21.00g/L；

曲拉通X-100 1.00ml/L。

3.一種結晶紫染色細胞核計數方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)將載有細胞的載體與權利要求1或2所述的消化染色液混合，進行染色和消化，得到染色液；

(2)對步驟(1)得到的染色液進行細胞核計數。

4.按照權利要求3所述的一種結晶紫染色細胞核計數方法，其特征在于：步驟(1)所述染色和消化的過程為在37±1℃下加熱30～35min。

5.按照權利要求4所述的一種結晶紫染色細胞核計數方法，其特征在于：所述加熱過程中每10～15min對體系進行搖晃。

6.按照權利要求3所述的一種結晶紫染色細胞核計數方法，其特征在于：步驟(2)所述細胞核計數的過程為將所述染色液稀釋10倍后在顯微鏡下計數。

7.按照權利要求6所述的一種結晶紫染色細胞核計數方法，其特征在于：步驟(1)中所用載體的數量為10片，消化染色液的體積為10ml；步驟(2)中所述顯微鏡下計數的方法為在顯微鏡下觀察計數板8個大方格中的細胞核并計數，細胞密度的計算公式為：

細胞密度

式中:X為8大方格中的細胞核總數，Z為每克載體的片數，Y為培養容器中載體總重量，V為培養容器的體積。

8.按照權利要求7所述的一種結晶紫染色細胞核計數方法，其特征在于：計數時與大方格邊線重合的細胞核遵循橫線上的細胞核計入下方大方格，豎線上的細胞核計入右邊大方格的原則。

9.按照權利要求3-8任一項所述的一種結晶紫染色細胞核計數方法，其特征在于：所述載體為片狀載體。

10.曲拉通X-100在細胞核計數過程中用于消化貼壁細胞的用途。