[發明專利]一種超交聯聚合物納米顆粒固相微萃取生物相容性探針及其在活體分析中的應用

在審

• 申請號: 202011279939.8
• 申請日: 2020-11-16
• 公開（公告）號: CN112547030A
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發明（設計）人: 陳超;劉舒芹;荀合;郭鵬然
• 申請（專利權）人: 廣東省測試分析研究所（中國廣州分析測試中心）
• 主分類號: B01J20/281
• 分類號: B01J20/281;B01J20/28;B01J20/30;G01N30/08
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 陳潔娣;莫瑤江

1.一種超交聯聚合物納米顆粒固相微萃取生物相容性探針，其特征在于，所述的固相微萃取生物相容性探針的表面含有超交聯聚合物納米顆粒和聚去甲腎上腺素生物相容涂層，所述探針的制備包括以下步驟：

S1：通過乳液聚合法合成前體納米顆粒，首先將十二烷基硫酸鈉均勻分散于超純水中，同時加入二乙烯基苯和4-氯甲基苯乙烯單體，在氮氣氛圍中攪拌均勻完成預乳化過程，隨后加入過硫酸鉀水溶液，在氮氣保護下升溫進行乳液聚合反應，反應完畢將乳液滴加到甲醇中破乳，離心分離獲得固體產品，并先后用純水、甲醇、無水乙醚分別洗滌產品后放入真空干燥箱中干燥，獲得前體納米顆粒；

S2：在1,2-二氯乙烷中加入無水FeCl₃催化劑并分散均勻，在另外的容器中加入1,2-二氯乙烷和前體納米顆粒，使前體納米顆粒在溶劑中溶脹一段時間后，與上述的1,2-二氯乙烷分散體系混合，隨后在氮氣保護下，迅速升溫進行Friedel-Crafts烷基化超交聯反應，反應結束后，固體產品先后分別用純水、甲醇、無水乙醚洗滌，隨后再在索氏提取器中抽提，萃取溶劑為甲醇，最終收集產物并于真空干燥箱中干燥，獲得超交聯聚合物納米顆粒；

S3：將石英材質的紫外光纖切割成合適長度，并在甲醇中浸泡并超聲處理，脫去保護層，隨后將石英光纖泡在氫氧化鈉溶液中進行表面活化，過量附著的氫氧化鈉使用鹽酸中和，常溫干燥，取適量聚丙烯腈在N,N-二甲基甲酰胺中超聲分散成均勻的粘稠膠狀液體，加入超交聯聚合物納米顆粒，繼續超聲分散均勻，獲得均勻的粘稠泥漿狀混合液，將石英光纖在混合液中垂直浸漬提拉以涂覆合適厚度的涂層，重復浸漬提拉過程，隨后在烘箱中固化，獲得表面涂覆有超交聯聚合物納米顆粒的石英探針；

S4：將去甲腎上腺素溶解于Tris緩沖溶液中，將上述涂覆有超交聯聚合物納米顆粒的石英探針浸泡在去甲腎上腺素的Tris溶液中，在常溫下靜置，使去甲腎上腺素發生自交聯反應從而在涂覆有超交聯聚合物納米顆粒的探針表面修飾上一層具有生物相容性的聚去甲腎上腺素涂層，反應完成后，將探針在甲醇中浸泡洗滌，獲得所述的超交聯聚合物納米顆粒固相微萃取生物相容性探針。

2.根據權利要求1所述的一種超交聯聚合物納米顆粒固相微萃取生物相容性探針，其特征在于，S1中，4-氯甲基苯乙烯單體、二乙烯基苯、十二烷基硫酸鈉和過硫酸鉀的質量比為1:(0.02～0.028):(0.1～0.15):(0.008～0.01)，聚合反應溫度為70～85℃，反應時間為5～7h。

3.根據權利要求1所述的一種超交聯聚合物納米顆粒固相微萃取生物相容性探針，其特征在于，S2中，所述的分散體系為氮氣保護下在1,2-二氯乙烷中加入無水FeCl₃催化劑并分散均勻所形成的體系，所述的無水FeCl₃與1,2-二氯乙烷的質量/體積比為(0.8～1.1)g:16mL，溶脹時間為2～4h，超交聯反應溫度為70～85℃，反應時間為17～20h，索氏抽提時間為20～26h。

4.根據權利要求1所述的一種超交聯聚合物納米顆粒固相微萃取生物相容性探針，其特征在于，S3中，所述的聚丙烯腈與N,N-二甲基甲酰胺是按80～120mg/0.8～1.2mL的料液比進行混合，所述的超交聯聚合物納米顆粒與N,N-二甲基甲酰胺的料液比為40～60mg/0.8～1.2mL。

5.根據權利要求1所述的一種超交聯聚合物納米顆粒固相微萃取生物相容性探針，其特征在于，S3中，石英紫外光纖切割的長度為8cm，氫氧化鈉溶液的濃度為0.1M，浸漬提拉次數為1～4次。

6.根據權利要求1所述的一種超交聯聚合物納米顆粒固相微萃取生物相容性探針，其特征在于，S4中，所述的Tris緩沖溶液的濃度和pH值分別為10mM和8.5，去甲腎上腺素Tris溶液中去甲腎上腺素的濃度為1.5～2.2mg/mL，自交聯反應時間為12～24h。

7.根據權利要求1所述的一種超交聯聚合物納米顆粒固相微萃取生物相容性探針，其特征在于，所述表面涂層的長度為1～3cm，厚度為20～100μm。