[發明專利]Hsp16-3過表達的結核分枝桿菌H37Ra菌株的構建及其應用在審
| 申請號： | 202011278428.4 | 申請日： | 2020-11-16 |
| 公開（公告）號： | CN112280729A | 公開（公告）日： | 2021-01-29 |
| 發明（設計）人： | 張萬江;李垚;陳雪峰;王菊;張春軍;張杰;董江濤;吳芳;吳江東;柳小玲;梁粟 | 申請（專利權）人： | 石河子大學 |
| 主分類號： | C12N1/21 | 分類號： | C12N1/21;C12N15/31;C12N15/74;C12R1/32 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 832002 新疆維*** | 國省代碼： | 新疆;65 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | hsp16 表達 結核 分枝桿菌 h37ra 菌株 構建 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.結核桿菌小分子熱休克蛋白Hsp16-3（以下簡稱Hsp16-3）過表達的結核分枝桿菌國際標準無毒株H37Ra菌（以下簡稱H37Ra菌）菌株的構建，其特征在于，包括以下步驟：
步驟1. 大腸桿菌-結核桿菌重組穿梭質粒載體pMV361- Hsp16-3的構建及鑒定
首先，接種及培養結核桿菌國際標準強毒株H37Rv菌株(以下簡稱H37Rv菌)；第二，提取和鑒定H37Rv菌基因組DNA；第三，以H37Rv菌基因組DNA為模板，PCR擴增結核桿菌小分子熱休克蛋白Hsp16-3基因，并純化和回收PCR擴增產物；第四，以大腸桿菌-結核桿菌穿梭質粒pMV361為載體，構建及鑒定大腸桿菌-結核桿菌重組穿梭質粒載體pMV361- Hsp16-3；
步驟2. Hsp16-3過表達的H37Ra菌株的構建及鑒定
利用電穿孔技術，將構建的大腸桿菌-結核桿菌重組穿梭質粒載體pMV361- Hsp16-3，轉入H37Ra菌內，經Realtime-PCR技術檢測及鑒定，成功構建Hsp16-3過表達的H37Ra菌株。
2.根據權利要求1所描述的Hsp16-3過表達的H37Ra菌株的應用，其特征在于，為研究Hsp16-3對H37Ra菌的致病性、免疫保護作用等方面的調控機制，以及新型結核病疫苗研發奠定基礎。
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