[發(fā)明專利]逆轉(zhuǎn)錄酶突變體及逆轉(zhuǎn)錄方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011271786.2
• 申請(qǐng)日: 2020-11-13
• 公開（公告）號(hào): CN114480337B
• 公開（公告）日: 2023-07-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蔣析文;劉靄珊;鄭桑桑;趙繼光
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州達(dá)安基因股份有限公司
• 主分類號(hào): C12N9/12
• 分類號(hào): C12N9/12;C12N15/54;C12P19/34
• 代理公司: 上海助之鑫知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31328
• 代理人: 陳詳

1.一種M-MLV酶突變體，其特征在于，所述M-MLV突變體在SEQ?ID?NO.1所示的氨基酸序列基礎(chǔ)上突變2個(gè)位點(diǎn)，所述M-MLV酶突變體在第313位氨基酸殘基和第221位氨基酸殘基發(fā)生突變；并且，第313位的氨基酸殘基位點(diǎn)突變?yōu)镚ln，第221位的氨基酸殘基位點(diǎn)突變?yōu)锳rg；其中氨基酸殘基編號(hào)對(duì)應(yīng)于SEQ?ID?NO.1所示的編號(hào)。

2.一種多核苷酸分子，其特征在于，所述多核苷酸分子編碼權(quán)利要求1所述的M-MLV酶突變體。

3.一種載體，其特征在于，所述載體含有權(quán)利要求2所述的多核苷酸分子。

4.一種宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞含有權(quán)利要求3所述的載體或染色體整合有權(quán)利要求2所述的多核苷酸分子。

5.如權(quán)利要求4所述的宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞為原核細(xì)胞、或真核細(xì)胞。

6.一種試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含權(quán)利要求1所述的M-MLV酶突變體。

7.?一種制備權(quán)利要求1所述的M-MLV酶突變體的方法，其特征在于，包括步驟：

(i)在適合的條件下，培養(yǎng)權(quán)利要求4所述的宿主細(xì)胞，從而表達(dá)出所述的M-MLV酶突變體；和

(ii)分離所述的M-MLV酶突變體。

8.權(quán)利要求1所述的M-MLV酶突變體在制備逆轉(zhuǎn)錄檢測試劑或逆轉(zhuǎn)錄試劑盒中的用途。

9.一種非診斷目的的RNA逆轉(zhuǎn)錄方法，其特征在于，所述方法包括步驟：

（1）提供含有RNA的樣品；

（2）逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)：

使用權(quán)利要求1所述的逆轉(zhuǎn)錄酶突變體對(duì)步驟（1）提供的含有RNA的樣品進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。