[發(fā)明專(zhuān)利]構(gòu)建原位原發(fā)胃癌動(dòng)物模型的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011266740.1
• 申請(qǐng)日: 2020-11-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114480250B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-09-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳崇;陸政昊;劉玉
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 四川大學(xué)華西醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/071
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/071;C12N5/10;A01K67/027;A61K49/00
• 代理公司: 成都高遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

1.一種構(gòu)建原位原發(fā)胃癌動(dòng)物模型的方法，其特征在于，包括：

將遺傳改造的小鼠胃類(lèi)器官注射到小鼠胃組織內(nèi)；

所述遺傳改造是指敲除抑癌基因，和/或過(guò)表達(dá)癌基因；

所述遺傳改造具體為如下任一情形：

a.敲除TP53、APC、CDKN2A、MLL3基因；

b.敲除TP53、CDH1、ARID1A基因，過(guò)表達(dá)MYC基因；

所述胃癌為胃腺癌。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：

所述遺傳改造還包括對(duì)類(lèi)器官轉(zhuǎn)入熒光標(biāo)記基因。

3.權(quán)利要求1～2任一所述的方法制備得到的動(dòng)物模型在藥物篩選、藥物毒性試驗(yàn)中應(yīng)用。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：

所述胃類(lèi)器官的培養(yǎng)基是在DMEM/F12培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，加上如下添加劑得到：

。

5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于：所述培養(yǎng)基是在DMEM/F12培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，加上如下添加劑得到：

。

6.一種如權(quán)利要求1-4中胃類(lèi)器官的培養(yǎng)方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)取小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞混合基質(zhì)膠Matrigel；

2)待Matrigel凝固，使用權(quán)利要求4或5所述培養(yǎng)基培養(yǎng)得到類(lèi)器官。

7.如權(quán)利要求6所述的培養(yǎng)方法，其特征在于：

步驟1)的胃粘膜上皮細(xì)胞是原代培養(yǎng)的胃粘膜上皮細(xì)胞。