[發明專利]一種紅豆杉枝葉苯丙素類化合物及其提取分離方法和應用

有效

• 申請號: 202011266567.5
• 申請日: 2020-11-12
• 公開（公告）號: CN112250651B
• 公開（公告）日: 2023-08-22
• 發明（設計）人: 姜萍;趙雅潔;陳華芳;王飛
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: C07D311/18
• 分類號: C07D311/18;A61P35/00;A61K31/37
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 邱興天

本發明公開了一種紅豆杉枝葉苯丙素類化合物及其提取分離方法和應用，屬于苯丙素類化合物提取分離技術領域。本發明從紅豆杉枝葉中提取分離制備了一種新的苯丙素類化合物Pu1，該方法操作簡單，生產成本低，產率高。以MTT法檢測提取分離的苯丙素類化合物Pu1的抗腫瘤活性，抗腫瘤活性選用人乳腺癌、人宮頸癌和人肝癌三種癌細胞。結果顯示Pu1抑制三種癌細胞活性的ICsubgt;50/subgt;值分別為75.7μmol·Lsupgt;?1/supgt;、54.7μmol·Lsupgt;?1/supgt;和33.8μmol.Lsupgt;?1/supgt;，對照樣依托泊苷的ICsubgt;50/subgt;值分別為4.8μmol·Lsupgt;?1/supgt;、7.5μmol·Lsupgt;?1/supgt;和5.9μmol·Lsupgt;?1/supgt;，表明苯丙素類類化合物Pu1具有一定的抗腫瘤作用。

技術領域

本發明屬于苯丙素類化合物提取分離技術領域，具體涉及一種紅豆杉枝葉苯丙素類化合物及其提取分離方法和應用。

背景技術

紅豆杉（taxus）又名赤松柏，紫杉，其為紅豆杉科紅豆杉屬植物，是一種天然珍稀抗癌植物，在地球上已有250萬年的歷史。紅豆杉在全世界范圍內有11種，在中國有4種和1個變種，即中國紅豆杉、東北紅豆杉、西藏紅豆杉、南方紅豆杉、云南紅豆杉。我國天然的紅豆杉植物雖然分布廣泛，但是其數量較為稀少、極少能成林，且生長較為緩慢。目前，我國紅豆杉資源主要是人工栽培，主要分布在四川、廣西、山東、黑龍江等省，其紅豆杉資源占世界一半以上。紅豆杉屬植物是世界上公認的珍貴藥用植物，也是我國的一級保護植物。然而，近些年，由于非法人員任意地砍伐、采、剝紅豆杉屬植物，其遭遇到了嚴重的破壞，導致紅豆杉資源日益匱乏，因此，要加強對紅豆杉樹木的保護，合理利用資源，并研究出高效培育紅豆杉植物的方法，使紅豆杉資源可以持續地利用及發展。目前，已經從紅豆杉植物中分離得到了紫杉烷類二萜化合物、黃酮類化合物、糖苷類化合物、甾體類化合物、倍半萜類化合物、木脂素類化合物及其它化合物等多種有效活性成分。其中苯丙素類化合物有少許的研究報道，尤其是化合物?(E)-1-methoxy-2-O-(p-coumaroyl)-myo-inositol（(E)-1-甲氧基-2-O-(對香豆酰)-肌醇）的提取分離制備方法及其抗腫瘤活性的研究尚未見報道。

發明內容

針對現有技術存在的上述問題，本發明所要解決的第一技術問題在于提供一種紅豆杉枝葉苯丙素類化合物的提取分離方法；本發明所要解決的第二技術問題在于提供上述方法提取分離得到的紅豆杉枝葉苯丙素類化合物；本發明所要解決的第三技術問題在于提供紅豆杉枝葉苯丙素類化合物作為抗癌藥物的有效成分的應用。

為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案如下：

一種紅豆杉枝葉苯丙素類化合物的提取分離方法，包括以下步驟：

1）采集新鮮紅豆杉枝葉，并進行預處理備用；

2）加入提取溶液，超聲波輔助提取、過濾多次，濾液合并，真空濃縮得粗提物；

3）石油醚萃取粗提物，向石油醚萃取后的剩余相中加入氯仿進行萃取，再向氯仿萃取后的剩余相中加入乙酸乙酯進行萃取，得到乙酸乙酯萃取相和水相；

4）將乙酸乙酯萃取相真空濃縮至干得乙酸乙酯萃取物，乙酸乙酯萃取物經大孔吸附樹脂柱分離，采用乙醇-水作洗脫劑進行梯度洗脫，獲得乙醇洗脫物；

5）乙醇洗脫物經硅膠柱分離，減壓濃縮，冷凍干燥，獲得苯丙素類化合物。

進一步的，紅豆杉枝葉苯丙素類化合物的提取分離方法，包括以下步驟：

（1）采集新鮮紅豆杉枝葉，自然風干，用粉碎機粉碎，過30-60目篩；

（2）加入提取溶液，超聲波輔助提取3次，每次提取50min，過濾，濾液合并，真空濃縮至原體積1/3，得粗提物；