[發(fā)明專利]一種紅豆杉枝葉苯丙素類化合物及其提取分離方法和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011266567.5
• 申請日: 2020-11-12
• 公開（公告）號: CN112250651B
• 公開（公告）日: 2023-08-22
• 發(fā)明（設計）人: 姜萍;趙雅潔;陳華芳;王飛
• 申請（專利權）人: 南京林業(yè)大學
• 主分類號: C07D311/18
• 分類號: C07D311/18;A61P35/00;A61K31/37
• 代理公司: 南京申云知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 邱興天

1.一種紅豆杉枝葉苯丙素類化合物的提取分離方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)采集新鮮紅豆杉枝葉，自然風干，用粉碎機粉碎，過30-60目篩，進行預處理備用；

(2)加入提取溶液，超聲波輔助提取3次，每次提取50min，過濾，濾液合并，真空濃縮至原體積1/3，得粗提物；所述提取溶液為質量濃度為60％的乙醇水溶液；提取固液比為1∶10；提取溫度為50℃；

(3)在粗提物中加入5倍質量的水，攪拌，再加入粗提物質量5倍的石油醚萃取5-6次，向石油醚萃取后的剩余相中加入粗提物質量5倍的氯仿萃取5-6次，再向氯仿萃取后的剩余相中加入粗提物質量5倍的乙酸乙酯萃取5-6次，得到乙酸乙酯萃取相和水相；

(4)將乙酸乙酯萃取相真空濃縮至干得乙酸乙酯萃取物，乙酸乙酯萃取物經(jīng)大孔吸附樹脂柱分離，采用乙醇-水作洗脫劑進行梯度洗脫，分別用水，10％、20％、30％、40％、50％、95％體積分數(shù)的乙醇依次洗脫，洗脫速度10mL/min，收集用20％的乙醇洗脫液，減壓濃縮，得20％的乙醇洗脫物；所述大孔吸附樹脂柱為AB-8大孔吸附樹脂柱；按上樣量的100倍裝柱，用10％乙醇溶液完全溶解乙酸乙酯萃取物，上樣到AB-8大孔吸附樹脂柱上；

(5)20％的乙醇洗脫物經(jīng)硅膠柱分離，采用二氯甲烷-甲醇系統(tǒng)洗脫，得到100％二氯甲烷洗脫液，經(jīng)HPLC分析，富集保留時間為13.033min餾分，減壓濃縮，冷凍干燥，獲得苯丙素類化合物Pu1，苯丙素類化合物Pu1為(E)-1-甲氧基-2-O-(對香豆酰)-肌醇。

2.權利要求1所述方法獲得的紅豆杉枝葉苯丙素類化合物作為抗癌藥物的有效成分的應用，所述癌為人乳腺癌、人宮頸癌和人肝癌。