[發明專利]一種新型納米分子MRI靶向血栓造影劑及其制備方法

在審

• 申請號: 202011257781.4
• 申請日: 2020-11-12
• 公開（公告）號: CN112245597A
• 公開（公告）日: 2021-01-22
• 發明（設計）人: 郭惠莊;鐘陶
• 申請（專利權）人: 廣州市番禺區中心醫院
• 主分類號: A61K49/10
• 分類號: A61K49/10;A61K49/14;B82Y25/00
• 代理公司: 北京盛凡智榮知識產權代理有限公司 11616
• 代理人: 劉玉珠

本發明涉及一種新型納米分子MRI靶向血栓造影劑及其制備方法，它包括造影劑，所述的造影劑的制備方法包括如下步驟：步驟一：KGDS多肽修飾的人鐵蛋白的表達與純化，在人鐵蛋白H亞基的N端連接KGDS多肽段，則得到KGDS－Fn，轉化感受態的大腸桿菌E.coli獲得表達KGDS－Fn的菌株；步驟二：KGDS修飾的鐵蛋白納米載體(KGDS－FRT)對Gd?DOTA的負載；步驟三：多功能鐵蛋白納米載體的基礎表征測試；步驟四：多功能鐵蛋白納米載體相關性質檢測本發明與現有技術相比的優點在于：制備具有高效靶向性、生物相容性的新型去鐵蛋白(Apoferritin)納米載體，傳輸MRI對比劑，實現對活化血小板的靶向MRI監測。

技術領域

本發明涉及生物材料領域，具體是指一種新型納米分子MRI靶向血栓造影劑及其制備方法。

背景技術

動脈粥樣硬化斑塊血栓形成越來越嚴重威脅人類健康，其危害性大，在正常血液循環中，血小板處于靜息狀態，當血管內皮損傷或粥樣斑塊破裂時血小板由靜息狀態轉化為活化狀態，這是血栓發生、發展的中心環節，因此，對活化血小板成像是診斷早期血栓形成的有效途徑。目前血栓成像在臨床上主要是超聲，CT，MRI等，雖然這些方法在臨床上初步成功，仍存在許多缺陷，研發合適的MRI分子靶向影像造影劑是一個非常重要的課題。

現有技術存在許多缺陷：首先，即使借助目前最好的影像技術，仍然有30％-40％的心肌梗死的血栓栓塞的來源不明，目前的影像方法還不能有效的探明血栓的脫落部位。其次是血栓檢測特異性問題。目前的影像學方法檢測血栓主要是間接的方法，并不能直接檢測血塊。

發明內容

本發明要解決的是以上技術問題，提供一種新型納米分子MRI靶向血栓造影劑及其制備方法。

為解決上述技術問題，本發明提供的技術方案為：一種新型納米分子MRI靶向血栓造影劑及其制備方法，它包括造影劑，所述的造影劑的制備方法包括如下步驟：

步驟一：KGDS多肽修飾的人鐵蛋白的表達與純化

通過基因工程的方法，在人鐵蛋白H亞基的N端連接KGDS多肽段，則得到KGDS－Fn，使其具有靶向活化血小板膜蛋白GPIIb/IIIa的能力，轉化感受態的大腸桿菌E.coli獲得表達KGDS－Fn的菌株，使用異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)誘導蛋白表達后，獲得表達量高、高度純化的KGDS－Fn，十二烷基硫酸鈉鄄聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS－PAGE)對產物蛋白進行驗證；

步驟二：KGDS修飾的鐵蛋白納米載體(KGDS－FRT)對Gd-DOTA的負載

負載Gd-DOTA，賦予載體MRI可視化特性，則得到KGDS－FRT-Gd；

步驟三：多功能鐵蛋白納米載體的基礎表征測試

使用透射電鏡、掃描電鏡和馬爾文粒徑分析儀檢測納米載體的形狀、尺寸及尺寸分布；

步驟四：多功能鐵蛋白納米載體相關性質檢測

①KGDS－Fn載藥量及藥物包封率

利用Gd-DOTA的標準曲線計算樣本中Gd-DOTA的濃度，進而計算包封率和載藥量。

②納米載體MRI顯像性能優化

檢測納米載體的MRI T1馳豫率、磁學性質(例如：飽和磁化強度)等，考察該納米載體的MRI顯像性能。

本發明與現有技術相比的優點在于：制備具有高效靶向性、生物相容性的新型去鐵蛋白(Apoferritin)納米載體，傳輸MRI對比劑，實現對活化血小板的靶向MRI監測。

附圖說明

圖1是本發明的Apoferritin納米載體的組裝示意圖。

具體實施方式