[發(fā)明專利]一種檢測唾液樣品中米諾環(huán)素的藥物濃度的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011257443.0
• 申請日: 2020-11-12
• 公開（公告）號: CN112461955B
• 公開（公告）日: 2022-06-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李敬來;彭俊;張?zhí)旌?/a>
• 申請（專利權(quán)）人: 國科卓越（北京）醫(yī)藥科技研究有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測唾液樣品中米諾環(huán)素的藥物濃度的方法，其特征在于，包括以下步驟：

A用濾紙采集給藥前及給藥后多時間點的服用過受試藥物動物口腔唾液樣本，減重法測定唾液采樣重量，干燥后放置于-20℃存放；

B對所述濾紙中加入飽和EDTAK2溶液和沉淀劑，所述沉淀劑為甲醇：乙腈按照體積比1:1配置，超聲提取10min，渦旋約30s，離心10min取上清液進(jìn)行LC-MS/MS分析；

C建立唾液中米諾環(huán)素檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

D通過所述標(biāo)準(zhǔn)曲線對所述濾紙中的米諾環(huán)素含量進(jìn)行定量檢測，并利用對應(yīng)的所述唾液樣本的取樣量，計算唾液中藥物含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測唾液樣品中米諾環(huán)素的藥物濃度的方法，其特征在于，所述標(biāo)準(zhǔn) 曲線建立的方法包括采用甲醇稀釋成系列濃度的米諾環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品工作溶液，在空白唾液濾紙滴加10μL各濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線工作液5，10，50，100，500，1000，5000ng/mL以及50μL內(nèi)標(biāo)工作液，干燥后對所述濾紙中加入飽和EDTAK₂溶液和沉淀劑，所述沉淀劑為甲醇：乙腈按照體積比1:1配置，超聲提取10min，渦旋約30s，離心10min取上清液進(jìn)行LC-MS/MS分析，獲得的不同唾液濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品用于標(biāo)準(zhǔn)曲線分析，以米諾環(huán)素含量為橫坐標(biāo)，待測物與內(nèi)標(biāo)峰面積比之為縱坐標(biāo)，用加權(quán)最小二乘法進(jìn)行回歸運算，所得直線回歸方程即為標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測唾液樣品中米諾環(huán)素的藥物濃度的方法，其特征在于，所述濾紙為層析濾紙。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測唾液樣品中米諾環(huán)素的藥物濃度的方法，其特征在于，采集待檢測動物的時間點為給藥后0.5、1、2、4、6、8、12、24、48、72、96、120、144、168h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測唾液樣品中米諾環(huán)素的藥物濃度的方法，其特征在于，受試個體為中大型動物。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測唾液樣品中米諾環(huán)素的藥物濃度的方法，其特征在于，所述受試藥物為易與金屬絡(luò)合的化合物，包括四環(huán)素類抗生素。