[發明專利]Myb28的遺傳標志物

在審

• 申請號: 202011256837.4
• 申請日: 2013-09-13
• 公開（公告）號: CN112501333A
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發明（設計）人: R·F·米森;M·特拉卡;B·W·布魯格曼斯
• 申請（專利權）人: 塞米尼斯蔬菜種子公司;植物生物科學有限公司
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 孟凡宏;謝燕軍

本發明涉及用于確定十字花科蔬菜植物的基因型以獲得具有增加的硫代葡萄糖苷水平的植物的方法，包括從所述植物或其部分獲得核酸樣品并在所述核酸樣品中檢測與增加的硫代葡萄糖苷水平遺傳關聯的Myb28基因座處的多態性。該多態性可包括以下至少一種：a)在對應于SEQ ID NO:1的核苷酸83、136、226、563、610、830、995、1116、1513、1577、1606、1620、1825、1863、1877或2026的位置處的單核苷酸多態性(SNP)或b)在SEQ ID NO:1的核苷酸323和332之間、核苷酸521和524之間、核苷酸783和786之間、核苷酸909和914之間、核苷酸1365和1369之間、1811和1821之間或核苷酸2046和2056之間存在的核苷酸數目的多態性或c)在SEQ ID NO:1的核苷酸836和837之間、核苷酸867和868之間或核苷酸943和944之間存在的核苷酸數目的多態性。

本申請是申請日為2013年9月13日、申請號為201310429743.6、發明名稱為“MYB28的遺傳標志物”的發明專利申請的分案申請。

相關申請的交叉引用

本申請要求2012年9月13日提交的美國臨時申請61/700,731號的利益，該申請通過引用全文并入。

序列表的并入

包含在微軟視窗操作系統中測量的21kb的名稱為“SEMB009US_ST25”的文件中和于2012年9月12日生成的序列表在此電子提交并通過引用并入。

技術領域

本發明涉及與賦予增加的硫代葡萄糖苷水平的轉錄因子Myb28基因座密切關聯的分子標志物的鑒定，及用于產生具有增加的硫代葡萄糖苷水平的十字花科蔬菜植物的方法。

背景技術

十字花科蔬菜植物(例如蕓苔屬(Brassica)植物，如花椰菜)積聚4-甲基亞硫酰基丁基硫代葡萄糖苷(蘿卜硫苷)和3-甲基亞硫酰基丁基硫代葡萄糖苷(屈曲花苷)。這些硫代葡萄糖苷水解成異硫氰酸鹽。流行病學研究使富含十字花科蔬菜的飲食與癌癥風險的降低相關聯。高硫代葡萄糖苷的十字花科蔬菜(例如，高硫代葡萄糖苷的花椰菜)已經如WO99/52345和PCT/GB2009/001648中所述產生。硫代葡萄糖苷在十字花科蔬菜植物中的產生是復雜的，如可從圖4中所示的植物中硫通量的圖中看到的。在本發明之前，甲基硫代烷基蘋果酸合酶(methylthioalkylmalate synthase)(MAM)代謝或分子標志物用于育種計劃中。已知MAM1和MAM3與高硫代葡萄糖苷性狀密切相關。

本發明人令人驚異地觀察到一些具有高硫代葡萄糖苷(例如，蘿卜硫苷)表型的蕓苔屬栽培種盡管與該性狀相關，但不具有MAM標志物等位基因，因此得出結論，MAM標志物并不必然與高硫代葡萄糖苷特性密切關聯或對于高硫代葡萄糖苷特性是關鍵的，且因此其在育種中用作標志物對于追蹤這一性狀并不是可靠的。

因此本發明人尋找到高硫代葡萄糖苷的標志物，其可以可靠地和一致地用于確定具有增加的硫代葡萄糖苷水平的植物的基因型。

發明簡述

本發明的基本發現是轉錄因子Myb28基因座是十字花科蔬菜植物(如蕓苔屬植物，例如花椰菜)中產生增加水平的硫代葡萄糖苷(特別是4-甲基亞硫酰基丁基硫代葡萄糖苷(蘿卜硫苷))和3-甲基亞硫酰基丁基硫代葡萄糖苷(屈曲花苷))的關鍵基因座。