[發明專利]一種使用全懸浮細胞測定雞新城疫病毒含量的方法在審
| 申請號: | 202011248277.8 | 申請日: | 2020-11-10 |
| 公開(公告)號: | CN112359142A | 公開(公告)日: | 2021-02-12 |
| 發明(設計)人: | 丁莉;劉漢平;李成山;左榕琳;邢剛;岳豐雄;潘倩;何洪奎;肖倩;裴倩如;汪強 | 申請(專利權)人: | 成都天邦生物制品有限公司;史記生物技術(南京)有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12R1/93 |
| 代理公司: | 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 李高峽;張娟 |
| 地址: | 610000 四川省*** | 國省代碼: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 使用 懸浮 細胞 測定 新城 疫病 含量 方法 | ||
1.一種雞新城疫病毒含量的測定方法,其特征在于,它包括如下步驟:
1)將雞新城疫病毒稀釋成不同的稀釋度;
2)接種至全懸浮鴨胚視網膜細胞中培養;
3)檢測血凝效價并計算病毒滴度;
步驟2)所述病毒接種時,需添加胰酶;胰酶終濃度為10-20μg/ml。
2.如權利要求1所述的測定方法,其特征在于,步驟1)所述的稀釋是以10倍濃度梯度進行稀釋。
3.如權利要求1所述的測定方法,其特征在于,步驟2)所述胰酶的終濃度是15μg/ml。
4.如權利要求1所述的測定方法,其特征在于,步驟2)所述的培養的溫度是35℃。
5.如權利要求1所述的測定方法,其特征在于,步驟2)接種病毒前需要補加占細胞培養物體積15%的DMEM培養基。
6.如權利要求1所述的測定方法,其特征在于,接種病毒時細胞密度為(6~8)×106/ml。
7.如權利要求1所述的測定方法,其特征在于,步驟2)是在5%CO2條件下培養。
8.如權利要求1所述的測定方法,其特征在于,步驟2)所述培養的時間是72-96h。
9.如權利要求8所述的測定方法,其特征在于,步驟2)所述培養的時間是72h。
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