[發明專利]用于細菌表達DacA時提高c-di-AMP產量的多核苷酸有效
| 申請號： | 202011247820.2 | 申請日： | 2020-11-10 |
| 公開（公告）號： | CN112342233B | 公開（公告）日： | 2022-08-26 |
| 發明（設計）人： | 蔣宇 | 申請（專利權）人： | 上海陶宇晟生物技術有限責任公司 |
| 主分類號： | C12N15/70 | 分類號： | C12N15/70;C12N15/65;C12N15/60;C12N1/21;C12P19/32;C12P19/36;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海申浩律師事務所 31280 | 代理人： | 賈師英 |
| 地址： | 201201 上海*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 細菌 表達 daca 提高 di amp 產量 多核苷酸 | ||
1. 一種用于細菌表達DacA時提高c-di-AMP產量的多核苷酸，其組成為：
Ptet-可變翻譯起始區-dacA，其中
Ptet是啟動子；可變翻譯起始區是ATG前17個堿基至ATG之后6個堿基的序列；dacA是編碼二腺苷酸環化酶DacA的基因，
當dacA后面連接有需要共轉錄且共翻譯的氨芐抗性基因時，所述可變翻譯起始區ATG前17個堿基由原始的SEQ ID NO: 1替換為選自下組的序列：
CCCATCGGAGTTTTAGGCAGCTTAAAC（SEQ ID NO: 2）；
CCCATCGGAGTTTTAAGGAGCTTTGAT（SEQ ID NO: 3），或者
所述可變翻譯起始區ATG前的6個堿基至ATG之后6個堿基的序列NNNNNNATGNNNNNN選自下組：
GGTACAATGGATTTT（SEQ ID NO: 5）；
GCTACAATGGATTTT（SEQ ID NO: 6）；
CCCAATATGGATTTT（SEQ ID NO: 7）。
2.如權利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，當dacA后面連接有需要共轉錄、但無需共翻譯的氨芐抗性基因時，所述可變翻譯起始區ATG前17個堿基由原始的SEQ ID NO: 1替換為SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3；或者
ATG前的6個堿基至ATG之后6個堿基的序列為SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6或SEQ IDNO: 7。
3.如權利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，當dacA后面連接有無需共轉錄氨芐抗性基因時，所述可變翻譯起始區ATG前17個堿基由原始的SEQ ID NO: 1替換為SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3。
4.如權利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，所述Ptet的核苷酸序列為SEQ ID NO:8。
5.如權利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，所述dacA的核苷酸序列為SEQ ID NO:9。
6.包含如權利要求1-5中任一項所述多核苷酸的載體。
7.轉化了如權利要求6所述載體的細菌。
8.表達如權利要求1-5中任一項所述多核苷酸的細菌。
9.如權利要求7或8所述的細菌，其特征在于，為大腸桿菌Nissle 1917 (EcN)。
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