[發(fā)明專(zhuān)利]抗人血清白蛋白單克隆抗體

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011247464.4
• 申請(qǐng)日: 2020-11-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112480247B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-09-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 于在林;富巖;楊小楠;侯瓊;富俞淞;陳穎
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 華通福源生物技術(shù)（北京）股份有限公司;天津溥瀛生物技術(shù)有限公司;北京美福源生物醫(yī)藥科技有限公司;天津林達(dá)生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07K16/18
• 分類(lèi)號(hào): C07K16/18;C12N5/20;G01N33/68
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種人血清白蛋白氨基酸序列在制備抗人血清白蛋白單克隆抗體中的應(yīng)用，其特征在于，包括如下步驟：采用人工合成的多肽氨基酸序列：

SEQ?ID?No.?FR1028:?CFAEEGKKLVAASQAALGL?作為人血清白蛋白表面抗原決定簇的氨基酸序列；

合成10mg如SEQ?ID?No.?FR1028所示的短肽，其中10mg中的5mg短肽經(jīng)化學(xué)偶聯(lián)KLH；

將200μg偶聯(lián)KLH的短肽+弗氏完全佐劑等體積混合并充分乳化，對(duì)小鼠實(shí)施基礎(chǔ)免疫，方法是腹腔注射BalB/c小鼠，每次注射體積為0.2ml，每個(gè)短肽同時(shí)免疫5只小鼠；免疫抗原偶聯(lián)KLH的短肽與弗氏不完全佐劑等體積混合并充分乳化，做二次免疫為每隔2周腹腔注射1次，每次注射體積為0.2?ml，偶聯(lián)KLH的短肽用量為100μg/只；將免疫原偶聯(lián)KLH的短肽與濃度為0.9%的生理鹽水混合，在進(jìn)行細(xì)胞融合前3天，對(duì)小鼠進(jìn)行加強(qiáng)免疫，腹腔注射，偶聯(lián)KLH的短肽用量為100μg/只；

二免后適時(shí)經(jīng)小鼠眼底采血，離心取血清后測(cè)小鼠免疫效果；具免疫反應(yīng)的小鼠按常規(guī)技術(shù)收集免疫小鼠的脾細(xì)胞與NS-1骨髓瘤細(xì)胞按6:1的比例，用聚乙二醇制劑

進(jìn)行融合；用HAT培養(yǎng)液選擇培養(yǎng)；融合后7-14天，取細(xì)胞培養(yǎng)上清，采用間接ELISA方法篩選分泌抗HSA的雜交瘤細(xì)胞株，對(duì)所得陽(yáng)性克隆株采用有限稀釋法進(jìn)行亞克隆，獲得單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株。