[發明專利]鴿毛滴蟲與白色念珠菌二聯卵黃抗體粉的制備方法及應用

有效

• 申請號: 202011246428.6
• 申請日: 2020-11-10
• 公開（公告）號: CN112358545B
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發明（設計）人: 何誠;王飛;張禾;蔡淯涵;黃中佐;嚴沛潔
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C07K16/20
• 分類號: C07K16/20;C07K16/14;C07K16/02;A61K39/395;A61P33/02;A61P31/10;A61P1/02
• 代理公司: 北京智為時代知識產權代理事務所(普通合伙) 11498
• 代理人: 王加嶺;楊靜

本發明提供了一種鴿毛滴蟲與白色念珠菌二聯卵黃抗體粉的制備方法及應用，制備方法通過獲得毛滴蟲與白色念珠菌的菌液；將毛滴蟲滅活獲得滅活毛滴蟲抗原、將白色念珠菌滅活獲得滅活白色念珠菌抗原；將上述2種滅活抗原與葡聚糖佐劑制備二聯滅活疫苗，免疫產蛋母雞；收集免疫后雞蛋，分離卵黃，以泊洛沙姆除去蛋黃中脂肪成分，然后濾液經過中空纖維超濾膜濃縮，獲得濃縮抗體，加入麥芽糊精低溫冷凍干燥獲得鴿毛滴蟲與白色念珠菌二聯卵黃抗體粉。其效價遠高于任何一種單獨卵黃抗體的結合效價，具有顯著防治毛滴蟲與白色念珠菌感染的效果，飼喂該粉劑可以有效防治信鴿、賽鴿、肉鴿和珍珠雞毛滴蟲、白色念珠菌感染引起的口腔、嗉囊潰瘍。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及鴿毛滴蟲與白色念珠菌二聯卵黃抗體粉及其制備方法。

背景技術

鴿毛滴蟲病，又稱鴿口腔潰瘍，亦稱為鴿癀，是常見的鴿病之一，病原是禽毛滴蟲，根據其寄生部位不同分為咽喉型和內臟型。咽喉型表現為口腔和咽喉黏膜形成粗糙鈕扣狀的黃色沉著物；濕潤者，稱為濕性潰瘍；呈干酪樣或痂塊狀則稱為干性潰瘍。臍部感染時，皮下形成腫塊，呈干酪樣或潰瘍性病變；內臟型即引起內臟器官出現黃色粗糙界線明顯的干酪樣病灶，結果導致實質器官組織壞死。病鴿因口腔潰瘍而妨害采食，在幼鴿和生長期鴿中可引起很高的死亡率。國內外資料報告，鴿毛滴蟲病任何品種、年齡的鴿均可感染。肉鴿年齡愈小感染率越高，其中乳鴿感染率高達91.2％，青年鴿感染率77.5％，成年鴿感染率最低為43.9％，平均感染率為70.9％，成鴿多數呈帶蟲者，未見有明顯癥狀；幼鴿病狀明顯，其中乳鴿的死亡率可達30％～80％。

白色念珠菌是一種重要的機會致病菌，常常與其他菌造成混合感染。鴿白色念珠菌感染稱為鵝口瘡，多無明顯的特征癥狀，常見生長緩慢，羽毛松亂，嗉囊逐漸增大并下垂，觸診嗉囊柔軟，壓迫有疼痛感。白色念珠菌病最常見的剖檢病變是嗉囊黏膜增厚，黏膜上帶有白色圓形隆起的潰瘍灶，潰瘍表面有剝離的傾向。黏膜上常有偽膜斑和易于除去的壞死物，口和食道可能出現潰瘍斑。造成動物機體食欲下降，給養殖業帶來巨大損失。鴿子從3-10日齡陸續發病，發病率達50％、死亡率達20％-30％。

目前，臨床上針對鴿毛滴蟲的預防治療抗生素主要采取甲硝唑(甲硝咪唑、滅滴靈)，飼喂方法為：每公斤飲水加入500mg，混飲3天、停藥3天，是企業推薦的用量。或者0.2g/片成鴿口服一日四分之一片，幼鴿八分之一片。用藥后必須添加緩解腎衰竭藥物3天，防治中毒。針對白色念珠菌的治療常常選擇用0.3％-0.5％的硫酸銅溶液盛放在飲水杯上供鴿自由飲用，連續3-5d。飼料中拌入制霉菌素25萬IU/kg，飼喂3天，停藥3天，再次飼喂3天，保證每只每次20-25萬單位。同時適時補給維生素A、復合維生素B，對大群防治有一定效果。也有研究表明，芍藥苷、大蒜素、當歸、黃連、金銀花、透骨草等中藥或提取物對白色念珠菌有一定的治療作用。

除了甲硝唑、制霉菌素人用藥物外，目前國內外都沒有針對鴿毛滴蟲與白色念珠菌專用、有效治療的藥物，也沒有針對相關內容的研究。臨床養殖中對這兩種疾病的預防治療主要采取甲硝唑、替硝唑、制霉菌素等抗生素或其他藥物來預防治療，造成了抗生物的濫用，同時造成了耐藥性的產生。為維護動物源性食品安全和公共衛生安全，現有飼料中要求全面禁止添加抗生素，減少濫用抗生素造成的危害，維護動物源食品安全和公共衛生安全。因此，在嚴峻的用藥形勢下，一種健康綠色的抗體藥物對信鴿、賽格、肉鴿和珍珠雞的養殖來說是迫切需要的。

發明內容

為了解決上述技術問題，本發明提供一種鴿毛滴蟲與白色念珠菌二聯卵黃抗體粉的制備方法，制備的鴿毛滴蟲與白色念珠菌二聯卵黃抗體粉用于防治鴿毛滴蟲與白色念珠菌病，可以替代抗菌素-甲硝唑、制霉菌毒素的使用，保證信鴿、賽鴿、肉鴿和珍珠雞健康綠色養殖。

為實現上述目的，本發明采用以下的技術方案為：

一種鴿毛滴蟲與白色念珠菌二聯卵黃抗體粉的制備方法，其包括如下步驟：

S1、培養獲得鴿毛滴蟲和白色念珠菌菌液；