[發明專利]一種基于表面增強拉曼光譜結合分子衍生化技術的地溝油中辣椒堿快速超靈敏檢測方法

有效

• 申請號: 202011245213.2
• 申請日: 2020-11-10
• 公開（公告）號: CN112540071B
• 公開（公告）日: 2022-08-23
• 發明（設計）人: 孫宗保;李君奎;鄒小波;郭志明;高云龍;牛增
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65;G01N1/28
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于食品質量快速檢測技術領域，涉及一種基于表面增強拉曼光譜結合分子衍生化技術的地溝油中辣椒堿的快速超靈敏檢測方法；步驟為：利用對氨基苯硫酚的巰基與金納米棒形成配位體系，增強基底與待測物質之間吸附力，使待測物質的拉曼信號極大增強；首先準備模擬地溝油樣本，合成表面增強拉曼基底，然后提取油品中的辣椒堿，進行重氮化反應；再對辣椒堿衍生物的表面增強拉曼光譜檢測及分析拉曼衍生物的特征峰；通過特征峰強度與辣椒堿濃度構建標準曲線；進而通過測定未知油品中的特征峰強度計算出辣椒堿濃度；本方法操作簡單，可以實現對油中辣椒堿的快速準確檢測，整個檢測過程可在1分鐘內完成，進而為地溝油的鑒別提供一種輔助方法。

技術領域

本發明屬于食品質量快速檢測技術領域，具體涉及一種基于表面增強拉曼光譜結合分子衍生化技術對地溝油中辣椒堿的快速超靈敏檢測方法。

背景技術

地溝油，主要包括三類，下水道中的油膩漂浮物或者將賓館、酒樓的剩飯、剩菜(通稱泔水)經過簡單加工、提煉出的油，下水道收集的油；二是劣質豬肉、豬內臟、豬皮加工以及提煉后產出的油；三是用于油炸食品的油使用次數超過規定要求后，再被重復使用或往其中添加一些新油后重新使用的油。盡管現在流入市場餐館中的地溝油經過過濾，蒸餾，脫色，除臭等精煉過程后顏色和氣味與正常食用油相同，但是仍含有重金屬離子，多環芳烴，生物毒素，以及油脂氧化過程中產生的降解產物等對人體健康產生重大威脅的有毒有害物質。食用地溝油后輕者會引起人們腹痛、嘔吐等腸胃疾病，嚴重的會引起貧血，中毒性肝病等。我國每年產生的地溝油總共約有500萬噸，雖然政府頒布各項政策以及向回收商提供補貼鼓勵廢油的收集管理和再利用(例如生物柴油)。但是，為了牟取更大的利益，不法商人將地溝油摻入食用油中流入百姓餐桌。多年來，地溝油在食用油行業已經成為嚴重的食品安全問題，不僅擾亂了市場，還嚴重危害到消費者的生命健康。

迄今為止，已經建立了許多不同的方法來檢測地溝油，其中包括光譜(近紅外，拉曼，太赫茲以及熒光)，核磁共振等非目標物檢測法，以及質譜(HPSEC，MALDI-MS，GC/MS，HPLC/MS，HPLC-ESI-MS/MS)等目標物分析法。但是常用的目標物分析法主要針對油中的膽固醇、脂肪酸等內源性成分，重金屬離子，多環芳烴，苯并芘，增塑劑，黃曲霉毒素等外源性成分和電導率等物理參數來區分地溝油和正常食用油。但值得注意的是有些指標只能根據國家食品安全標準來決定油品品質的好壞，有些指標的含量的超標可能是在加工運輸以及存儲引入，并不能作為特異性指標來判斷油品是否為地溝油。單純利用某個指標判定缺乏廣泛的適用性，只適于初步判別。因此，要準確判斷食用油是否含“地溝油”，必須建立油脂內源性的特異性指標與外源性的排除性指標相結合的多指標體系。辣椒堿是引起辣味的主要化學成分，主要存在于辣椒中，辣椒是餐飲業中使用量較大的調味料，辣椒中含有的辣椒素類物質具有脂溶性強、穩定性好、沸點高等特點，目前的地溝油加工工藝很難完全除去這類物質，而接觸過辣椒的餐廚廢棄油脂幾乎難以避免含有這種成分，因此可將辣椒素類物質作為鑒別餐廚廢棄油脂重要的外源性特征指標。

目前固相萃取-HPLC-MS法被國家衛生部認為是檢測辣椒素以鑒別地溝油的四種儀器檢查方法之一。除HPLC-MS外，還使用了UPLC-MS/MS，免疫親和層析結合LC-MS/MS，單克隆抗體和電化學傳感器等方法檢測辣椒素。但是，色譜和質譜分析繁瑣，費時，并且無法實現實時，快速的檢測。酶聯免疫和抗原抗體等方法需要特殊以及昂貴的試劑。綜上所述，盡管這些方法能夠檢測辣椒素，但是快速靈敏以及便捷實惠的檢測方法才能滿足市場和消費者的需求。

SERS具有靈敏度高、響應快、分子信息豐富、數據采集無破壞等優點，廣泛應用于生物分析、環境監測、食品安全等領域，甚至臨床診斷和治療。因此，利用SERS技術測定辣椒堿是一種非常有吸引力的方法。有文獻表明辣椒堿這類生物堿拉曼散射截面低，與金屬表面的親和力非常弱，這在很大程度上限制了辣椒堿的SERS檢測。但辣椒堿含有酚類結構，可以和重氮化試劑發生偶聯反應，生成分子量更大，拉曼活性較高的偶氮染料。因此，亟需建立一種低成本的、快速的、高效的實現地溝油的鑒別方法。

發明內容