[發明專利]一種表征COVID-19康復患者血漿中和抗體活性的間接ELISA檢測方法在審
| 申請號: | 202011241648.X | 申請日: | 2020-11-09 |
| 公開(公告)號: | CN112526139A | 公開(公告)日: | 2021-03-19 |
| 發明(設計)人: | 孔慶明;呂杭軍;袁亞杰;陸紹紅;高孟;卓洵輝;金子;丁豪杰;丁建祖;樓滌 | 申請(專利權)人: | 杭州醫學院 |
| 主分類號: | G01N33/68 | 分類號: | G01N33/68;G01N33/569;G01N33/543 |
| 代理公司: | 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224 | 代理人: | 沈金龍 |
| 地址: | 310053*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 表征 covid 19 康復 患者 血漿 中和 抗體 活性 間接 elisa 檢測 方法 | ||
1.一種表征COVID-19康復患者血漿中和抗體活性的間接ELISA方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)使用SARS-CoV-2病毒的RBD抗原與N抗原組合包被酶標板,包被后用封閉液進行封閉;
(2)將待檢測COVID-19康復患者的血漿稀釋后加入步驟(1)處理好的酶標板中孵育;
(3)洗板后,加入二抗孵育;
(4)孵育后洗板,然后加入顯色液顯色后檢測吸光度值,吸光度值越高表明該待檢測COVID-19康復患者的血漿中和抗體活性越高。
2.如權利要求1所述的間接ELISA檢測方法,其特征在于,步驟(1)中RBD抗原與N抗原的組合比例為1∶1/7~7。
3.如權利要求2所述的間接ELISA檢測方法,其特征在于,步驟(1)中RBD抗原與N抗原的組合比例為1∶3~5。
4.如權利要求1所述的間接ELISA檢測方法,其特征在于,步驟(2)中將待檢測COVID-19康復患者的血漿先滅活處理后,再稀釋。
5.如權利要求4所述的間接ELISA檢測方法,其特征在于,滅活時將待檢測COVID-19康復患者的血漿于56℃水浴鍋中進行30min滅活處理。
6.如權利要求4所述的間接ELISA檢測方法,其特征在于,稀釋時,先用封閉液進行1∶100初始稀釋,再以2倍梯度稀釋,共8個梯度。
7.一種表征COVID-19康復患者血漿中和抗體活性的間接ELISA檢測用的試劑盒,其特征在于,包括SARS-CoV-2病毒的RBD抗原與N抗原。
8.如權利要求7所述的試劑盒,其特征在于,RBD抗原與N抗原的組合比例為1∶1/7~7。
9.如權利要求8所述的試劑盒,其特征在于,RBD抗原與N抗原的組合比例為1∶3~5。
10.如權利要求7~9所述試劑盒在篩選血漿中和抗體活性的新冠血漿中的應用。
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