[發明專利]一種基于斑馬魚炎癥性腸病模型篩選藥效物質的方法有效
| 申請號： | 202011239439.1 | 申請日： | 2020-11-09 |
| 公開（公告）號： | CN112245596B | 公開（公告）日： | 2022-01-18 |
| 發明（設計）人： | 王毅;趙璐 | 申請（專利權）人： | 浙江大學 |
| 主分類號： | A61K49/00 | 分類號： | A61K49/00;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224 | 代理人： | 韓聰 |
| 地址： | 310013 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 基于 斑馬 炎癥 性腸病 模型 篩選 藥效 物質 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種基于斑馬魚炎癥性腸病模型篩選藥效物質的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)將待測物質加入到含有受精后24～72h的轉基因斑馬魚系Tg(Lyz:DsRed)胚胎的孵育液A中進行24h的預保護，再換液加入含有濃度為75μg/mL的三硝基苯磺酸的孵育液B，繼續孵育48h，得到給藥模型；
(2)利用與活性氧反應的熒光染料2’,7’-二氫二氯熒光素二乙酸酯對給藥模型的斑馬魚胚胎進行處理，熒光成像并分析斑馬魚胚胎腸道區域內的平均熒光強度，與未給藥模型組的活性氧水平進行比較，篩選平均熒光強度小于未給藥模型組70％的物質為目標物質；
還包括：利用熒光成像計算給藥模型斑馬魚胚胎腸道區域內中性粒細胞個數，再根據如下公式計算回調指數，篩選回調指數＞0.6的物質為目標物質；
X＝(nmodel-ndrug)/(nmodel-ncontrol)
其中X-回調指數，nmodel-未給藥模型組中性粒細胞個數，ndrug-給藥模型組中性粒細胞個數，ncontrol-空白組中性粒細胞個數。
2.如權利要求1所述的基于斑馬魚炎癥性腸病模型篩選藥效物質的方法，其特征在于，步驟(1)中，設置5～10個重復。
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