[發(fā)明專利]一種病原體微生物宏基因組去宿主方法及試劑盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011238096.7
• 申請日: 2020-11-09
• 公開（公告）號: CN112322701A
• 公開（公告）日: 2021-02-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 胡彬;王燁鳳;褚嘉豪;蔡媛媛
• 申請（專利權(quán)）人: 紹興迅敏康生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6806
• 分類號: C12Q1/6806
• 代理公司: 無錫市匯誠永信專利代理事務(wù)所(普通合伙) 32260
• 代理人: 李珍珍

1.一種病原體微生物宏基因組去宿主方法，其特征在于，包括以下步驟：

宿主細胞裂解：取檢測樣本加入變性劑孵育去人源細胞得到第一反應(yīng)液，其中變性劑至少包括saponin、吐溫20、Triton X-100、digitonin以及CHAPS

的一種或多種；

宿主核酸去除：配置添加有DNaseⅠ酶的緩沖液，混合第一反應(yīng)液和添加有DNaseⅠ酶的緩沖液孵育去除宿主核酸，得到第二反應(yīng)液；

病原體微生物核酸提取。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的病原體微生物宏基因組去宿主方法，其特征在于，緩沖液的成分包括：Tris-HCl，MgCl₂以及DTT。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的病原體微生物宏基因組去宿主方法，其特征在于，變性劑的試劑選擇：0.1-10％的saponin，0-2％的Triton X-100，0.1-4％的Digitonin，0-3％的CHAPS。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的病原體微生物宏基因組去宿主方法，其特征在于，適用于肺泡灌洗液、腦脊液、痰液、腹水的宏基因組檢測。

5.一種病原體微生物宏基因組去宿主試劑盒，其特征在于，包括：

變性劑，其中變性劑選自saponin、吐溫20、Triton X-100、digitonin以及CHAPS的一種或多種；

緩沖劑；

DNaseⅠ酶；

溶菌酶，或溶壁酶。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的病原體微生物宏基因組去宿主試劑盒，其特征在于，緩沖液的成分包括：Tris-HCl，MgCl₂以及DTT。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的病原體微生物宏基因組去宿主試劑盒，其特征在于，變性劑的試劑選擇：0.1-10％的saponin，0-2％的Triton X-100，0.1-4％的Digitonin，0-3％的CHAPS。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的病原體微生物宏基因組去宿主試劑盒，其特征在于，適用于肺泡灌洗液、腦脊液、痰液、腹水的宏基因組檢測。

9.一種病原體微生物宏基因組去宿主提取系統(tǒng)，其特征在于，包括：

去宿主模塊，其中去宿主模塊至少包括saponin、吐溫20、Triton X-100、digitonin以及CHAPS的一種或多種；

宿主核酸去除模塊，其中宿主核酸去除模塊包括緩沖劑和DNaseⅠ酶，其中緩沖劑包括Tris-HCl，MgCl₂以及DTT；

病原體微生物核酸提取模塊，其中病原體微生物核酸提取模塊包括溶菌酶或溶壁酶。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的病原體微生物宏基因組去宿主提取系統(tǒng)，其特征在于，適用于肺泡灌洗液、腦脊液、痰液、腹水的宏基因組檢測。