[發明專利]檢測心臟損傷早期標志物的多色熒光探針及其制備和使用方法

在審

• 申請號: 202011236376.4
• 申請日: 2020-11-09
• 公開（公告）號: CN112391158A
• 公開（公告）日: 2021-02-23
• 發明（設計）人: 廖曉玲;徐文峰;張園園
• 申請（專利權）人: 重慶科技學院
• 主分類號: C09K11/02
• 分類號: C09K11/02;C09K11/88;C09K11/58;C09K11/06;B82Y30/00;B82Y40/00;G01N21/64
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所(普通合伙) 11308
• 代理人: 黎昌莉

本發明屬于生物醫學檢測技術領域，涉及一種檢測心臟損傷早期標志物的多色熒光探針及其制備和使用方法。檢測心臟損傷早期標志物的多色熒光探針，其特征在于，所述多色熒光探針，是由CdSe/ZnSQDs@AuNCs、心臟損傷早期標志物抗體、熒光染料構成；所述多色熒光探針以CdSe/ZnSQDs@AuNCs為供體及熒光染料為受體的熒光共振能量轉移對；所述CdSe/ZnS QDs︰Au NCs︰熒光染料的體積比為0.5?1︰8?10︰0.1?5。本發明提供的多色熒光探針可以同時精確檢測兩種以上的心臟損傷早期標志物。

技術領域

本發明屬于生物醫學檢測技術領域，具體涉及一種檢測心臟損傷早期標志物的多色熒光探針及其制備和使用方法。

背景技術

心血管疾病的死亡率遠高于包括癌癥、艾滋病在內的其他慢性疾病。據2018年世界心臟聯盟統計，在世界范圍內，每死亡3人，就有1人死于心血管病。我國人群心血管疾病的發病和死亡率呈持續上升趨勢，據統計我國心血管疾病患者目前約2.6億人，每5個成年人中就有1人患心血管病，全國每年約300萬人死于心血管病，占總死亡人數的41％。因此，心血管疾病被稱為威脅人類健康的“頭號殺手”。心血管疾病如此兇險，究其原因是其臨床表現多為致死性的急發病，臨床指南要求病人發病入院到醫生得到病人心臟早期標志物的檢測結果時間不超過30min，從病人入院到醫生啟動溶栓治療不超過60min-90min，醫生需和時間賽跑。心臟早期標志物全稱為心臟損傷早期標志物，是指心臟損傷后6小時內血中水平升高的標志物，為臨床中診斷心肌梗死、心肌缺血、心衰等心臟疾病的重要檢測指標，主要包括C反應蛋白(CRP)、B型尿鈉肽(BNP)以及肌鈣蛋白(cTnI)等。這些指標在健康人血清中水平極低，而在機體受到感染或組織損傷時會顯著升高，對這些標志物的即時監測直接影響心血管疾病患者的臨床診斷、危險分層、治療方案選擇和預后判斷。然而，正因為存在極短時間需要做出正確診斷的高要求，心臟早期標志物的即時檢驗已然成為近年來整個心血管領域中關注的焦點。心臟早期標志物含量低，故檢測限的要求更加高，在要求靈敏度的同時，要求高的準確度。

國內外對心臟早期標志物的即時體外診斷(Point of Care Test，POCT)進行了大量的探索。現有技術中，金屬納米簇或量子點(quantum dots，QDs)具有諸多顯著優于傳統有機染料、熒光蛋白及其它熒光納米材料的發光性質，發射光譜尺寸可調、半峰寬窄、激發光譜寬、量子產率高、光穩定性好等，在化學、材料學、生物學及醫學等領域展現出巨大的應用前景。近年來，量子點作為新型納米材料具有一系列優異的獨特光學特性：如激發光譜范圍寬、發射光譜窄；發射波長可以通過改變量子點的尺寸大小及組成調控，可以使其發射光譜覆蓋整個可見光區；具有較高的熒光發射強度和較好穩定性。用量子點免疫熒光法研發了多種體外檢測試劑卡、試劑盒，主要配套熒光分析儀使用。但是，目前利用量子點技術的POCT還存心臟早期標志物的即時檢驗偏差較大的問題，檢測量級大多為mg/L。

基于此，為解決以上問題，本發明提出一種采用FRET檢測技術原理的金屬納米簇與量子點相結合的多色熒光探針的思路，開發了一種心臟損傷早期標志物多色熒光探針及制備和使用方法。

發明內容

有鑒于此，本發明在于提供一種檢測心臟損傷早期標志物的多色熒光探針。

進一步，所述多色熒光探針，是由CdSe/ZnSQDs@AuNCs、心臟損傷早期標志物抗體、熒光染料構成；所述多色熒光探針以CdSe/ZnSQDs@AuNCs為供體及熒光染料為受體的熒光共振能量轉移對；所述CdSe/ZnS QDs︰Au NCs︰熒光染料的體積比為0.5-1︰8-10︰0.1-5。

優選地，所述CdSe/ZnS QDs︰Au NCs︰熒光染料的體積比為1︰10︰1-5。

優選地，所述CdSe/ZnS QDs：Au NCs：熒光染料的體積比為1︰10︰1。