[發(fā)明專利]辣根過氧化物酶基因作為報(bào)告基因的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011234692.8
• 申請(qǐng)日: 2020-11-07
• 公開（公告）號(hào): CN112481279A
• 公開（公告）日: 2021-03-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 項(xiàng)陽;李軍;余樂;張婭;周雪莉;李晉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 武漢愛博泰克生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/53
• 分類號(hào): C12N15/53
• 代理公司: 武漢世躍專利代理事務(wù)所(普通合伙) 42273
• 代理人: 倪婭

1.一種辣根過氧化物酶基因作為報(bào)告基因的應(yīng)用，其步驟為：

首先設(shè)定待鑒定目標(biāo)物，根據(jù)目標(biāo)物和所激活的信號(hào)通路，確定所述信號(hào)通路對(duì)應(yīng)的啟動(dòng)子相應(yīng)原件的DNA，將所述原件的DNA與HRP基因的聯(lián)合基因克隆到表達(dá)載體里，然后轉(zhuǎn)染細(xì)胞，再用單一或多種濃度的目標(biāo)物處理轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞，激活信號(hào)通路，使HRP基因表達(dá)，之后再加入HRP的顯色底物，進(jìn)行定性或定量評(píng)價(jià)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述辣根過氧化物酶基因作為報(bào)告基因的應(yīng)用，其特征在于：所述定量評(píng)價(jià)是通過多種濃度的目標(biāo)物處理含有報(bào)告基因轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞，檢測(cè)HRP顯色底物的顯色值，計(jì)算EC50值，以進(jìn)行評(píng)價(jià)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述辣根過氧化物酶基因作為報(bào)告基因的應(yīng)用，其特征在于：所述HRP的顯色底物為TMB。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述辣根過氧化物酶基因作為報(bào)告基因的應(yīng)用，其特征在于：所述待鑒定目標(biāo)物選自轉(zhuǎn)染試劑、化學(xué)分子、多肽、抗體、蛋白、抗體中一種。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述辣根過氧化物酶基因作為報(bào)告基因的應(yīng)用，其特征在于：所述HRP基因的序列如基因庫GenBank中編號(hào)ANS10151.1所示。

6.一種基于HRP報(bào)告基因的活性鑒定載體，其特征在于：所述載體上包含預(yù)設(shè)的HRP基因，且HRP基因前設(shè)有可編輯的啟動(dòng)子插入位點(diǎn)。