[發明專利]一種酶催化合成手性亞砜化合物的方法

在審

• 申請號: 202011233815.6
• 申請日: 2020-11-07
• 公開（公告）號: CN112195200A
• 公開（公告）日: 2021-01-08
• 發明（設計）人: 韓嘉欣;萬洪善;高文政
• 申請（專利權）人: 韓嘉欣
• 主分類號: C12P11/00
• 分類號: C12P11/00;C12N9/20
• 代理公司: 連云港潤知專利代理事務所 32255
• 代理人: 劉喜蓮

1.一種酶催化合成手性亞砜化合物的方法，其特征在于：該方法以南極假絲酵母脂肪酶B進行酶催化生產亞砜；合成反應以乙酸乙酯為溶劑，以官能化的硫化物和過氧化氫或尿素過氧化氫為氧化物為原料合成得到亞砜化合物。

2.根據權利要求1所述的一種酶催化合成手性亞砜化合物的方法，其特征在于，其步驟如下：

(1)硫化物的合成：將去離子水、碳酸鉀、官能化的苯酚和碘乙烷添加到裝有磁力攪拌器的微波瓶中，每100mL離子水中加入碳酸鉀1.1－1.3eq、官能化的苯酚18－22g、碘乙烷按1.4－1.6eq；微波實驗在135℃－145℃的溫度下進行；前5－6分鐘后，通過薄層色譜在紫外下監控反應或用碘染色；當產物中仍有原料時，則將反應再保留5－10分鐘；用水和二乙醚Et₂O沖洗微波瓶；再次用Et₂O萃取水相；將有機相加回到漏斗中，并用水和鹽水洗滌；然后將有機相用硫酸鎂干燥并過濾；干燥有機相通過旋轉蒸發儀蒸發；壓力從500mbar開始，然后在用DCM/戊烷汽提產品時降低壓力；

(2)芐乙基硫化物的合成：將去離子水、氫氧化鈉、芐硫醇和碘乙烷在室溫下混合攪拌24小時，每100mL去離子水中加入氫氧化鈉1.1－1.3eq、芐硫醇18－22g、碘乙烷2.8－3.2eq；然后在UV燈下通過TLC檢查反應；萃取和旋轉蒸發步驟與上述硫化物相同；

(3)亞砜化合物的合成：將乙酸乙酯EtOAc，官能化的硫化物，CALB和過氧化物按順序加入到圓底燒瓶中，每300mL乙酸乙酯EtOAc中加入45－55g官能化的硫化物和1.0－1.2eq過氧化物，CALB適量；搖動實驗在36－38℃下進行了幾天；在TLC檢查之后，將產物通過硅藻土過濾，硅藻土事先用EtOAc潤濕；過氧化物為30％的過氧化氫H₂O₂或尿素過氧化氫UHP；

在分離漏斗中，加入適量的作為還原劑的10％硫代硫酸鈉Na₂S₂O₄萃取反應；將內容物倒入漏斗中，并將漏斗搖動兩次；收集水相，并再次添加適量的10％硫代硫酸鈉Na₂S₂O₄，以確保反應被徹底淬滅；收集水層和有機層；用EtOAc萃取水相；將有機相加回到漏斗中，并用水和鹽水洗滌；然后將有機相干燥并在旋轉蒸發儀上蒸發；壓力從120mbar開始，然后在用二氯甲烷/正己烷己烷汽提產物時降低；蒸發后，將產物放置五分鐘，以使沒有汽提溶劑。

3.根據權利要求1所述的一種一種酶催化合成手性亞砜化合物的方法，其特征在于，步驟(3)中，蒸發后，將產物放置五分鐘后，產物核磁，當圖譜顯示原料時，則需快速色譜柱進行分離，梯度洗脫系為正己烷：乙酸乙酯＝3：1至2.5。

4.根據權利要求1所述的一種一種酶催化合成手性亞砜化合物的方法，其特征在于，步驟(1)硫化物的合成中：將100mL去離子水，1.2eq碳酸鉀，200g官能化的苯酚和1.5eq碘乙烷按特定順序添加到裝有小型磁力攪拌器的10mL微波小瓶中；微波實驗在140℃的溫度下進行；前5分鐘后，通過薄層色譜在紫外下監控反應或用碘染色；如果產物中仍然有一些原料，則將反應再保留5分鐘；用水和二乙醚Et₂O沖洗微波小瓶，以確保漏斗中的體積大致相同；再次用Et₂O萃取水相；將有機相加回到漏斗中，并用水和鹽水洗滌；然后將有機相用硫酸鎂干燥并過濾；干燥有機相通過旋轉蒸發儀蒸發；壓力從500mbar開始，然后在用DCM/戊烷汽提產品時降低壓力。

5.根據權利要求1所述的一種酶催化合成手性亞砜化合物的方法，其特征在于，步驟(2)芐乙基硫化物的合成中：將100mL去離子水，1.2eq當量的氫氧化鈉，20g芐硫醇和3eq的碘乙烷在室溫下攪拌24小時；然后在UV燈下通過TLC檢查反應；萃取和旋轉蒸發步驟與上述硫化物完全相同。

6.根據權利要求1所述的一種一種酶催化合成手性亞砜化合物的方法，其特征在于，步驟(3)亞砜化合物的合成中：將300mL乙酸乙酯EtOAc，5g官能化的硫化物，20w/w％CALB和1.1eq過氧化物按順序加入到5mL圓底燒瓶中；搖動實驗在37℃下進行了幾天；在TLC檢查之后，將產物通過硅藻土過濾，硅藻土事先用EtOAc潤濕；

在分離漏斗中，加入作為還原劑的120mL 10％硫代硫酸鈉Na₂S₂O₄萃取反應；將內容物倒入漏斗中，并將漏斗搖動兩次；收集水相，并再次添加120mL的10％硫代硫酸鈉Na₂S₂O₄，以確保反應被徹底淬滅；收集水層和有機層；用EtOAc萃取水相；將有機相加回到漏斗中，并用水和鹽水洗滌；然后將有機相干燥并在旋轉蒸發儀上蒸發；壓力從120mbar開始，然后在用二氯甲烷/正己烷己烷汽提產物時降低；蒸發后，將產物放置五分鐘，以使沒有汽提溶劑。